Técnicas de Tinción en Histología: Lípidos, Proteínas, Ácidos Nucleicos, Minerales y Pigmentos

Enviado por Comunidad Xuletas y clasificado en Biología

Escrito el en español con un tamaño de 4,78 KB

Demostración de Lípidos

  • Técnica del Sudán IV: En cortes por congelación, los lípidos se tiñen de rojo y los núcleos de azul.
  • Técnica del Sudán Negro: Los núcleos y el citoplasma se tiñen de rojo, mientras que los lípidos y la mielina se tiñen de negro.
  • Coloración Azul de Nilo: Los ácidos grasos se tiñen de azul oscuro y las grasas neutras de rosa a rojo.

Demostración de Proteínas

  • Reacciones Generales: Colorean todas las proteínas del tejido.
  • Reacciones de Grupo: Colorean un corto número de grupos específicos de estas sustancias.
  • Reacciones Específicas: Se utilizan para grupos químicos particulares que se encuentran en determinados aminoácidos.

Demostración de Ácidos Nucleicos

  • Extracción del ADN y ARN: Se realiza mediante hidrólisis ácida para separar el ácido nucleico de las proteínas.
  • Reacción de Feulgen (ADN): La hidrólisis ácida rompe el enlace entre la pentosa y la base nitrogenada. El ADN en reposo se tiñe de rosado y en duplicación de rojo intenso.
  • Técnica Verde Metilo Pironina: Estos colorantes básicos tienen apetencia por grupos ácidos ionizables pertenecientes al ácido fosfórico. Permite distinguir entre ADN y ARN. Los núcleos con ADN se tiñen de verde y el citoplasma con ARN de rojo.

Demostración de Minerales

  • Azul de Perls (Hierro Férrico): El método de azul de Perls es el método de elección para determinar los iones férricos (Fe3+), que son los más abundantes, y desenmascara las proteínas. Se basa en la propiedad que tiene el ferrocianuro potásico para transformarse, en presencia de hierro férrico, en ferrocianuro férrico por acción del ácido clorhídrico, que actúa como desencadenante de la reacción.
  • Azul de Turnbull (Hierro Ferroso): El hierro ferroso (Fe2+) del tejido reacciona con el ferricianuro potásico en medio ácido y se transforma en ferricianuro ferroso o azul de Turnbull, de color azul.
  • Tirmann Schmeltzer (para ambos tipos de hierro): El hierro férrico se transforma en hierro ferroso y luego se utiliza la técnica del azul de Turnbull.

Comentario sobre la tinción que pone de manifiesto el hierro orgánico más frecuente

Métodos para la demostración de hierro: El hierro férrico que teñimos se encuentra en la médula ósea, el bazo, el hígado y los ganglios linfáticos. El hierro en el organismo se puede encontrar de dos formas:

  • Hierro en forma iónica: Se encuentra formando sales, normalmente en forma de cloruros o hidróxidos.
  • Hierro unido a proteínas o enmascarado: No podemos detectarlo directamente, sino que es necesario someterlo a un proceso de desenmascaramiento para transformarlo en hierro iónico.

Demostración de Pigmentos: Melanina

  • Técnica de Argentafinidad de Masson-Fontana: Se basa en la propiedad que tienen algunos tejidos de reducir el nitrato de plata amoniacal a plata metálica sin la acción de agentes reductores externos. Se utiliza para teñir melanocitos, glándulas pilóricas del estómago, criptas de Lieberkühn y mucosa del apéndice.
  • Técnica de Decoloración de la Melanina: Es más sencilla. Utiliza agentes oxidantes que decoloran la melanina, por lo que también recibe la denominación de blanqueamiento.
  • Métodos Histoenzimáticos: Determinan la DOPA-oxidasa, una enzima de los melanocitos.
  • Métodos que Emplean la Fluorescencia: Se basan en la propiedad de las células con granulaciones citoplasmáticas que contienen derivados de aminoácidos esenciales de mostrar autofluorescencia tras un tratamiento previo con paraformaldehído.

Fibras Colágenas

Se utilizan técnicas tricrómicas (con 3 o más colorantes distintos):

  • MSB Masson: Núcleo azul, citoplasma y fibras musculares rojas, colágeno y reticulina azul o verde.
  • Mallory: Núcleo rojo, citoplasma y fibras musculares estriadas y eritrocitos naranja, músculo liso violáceo, tejido conjuntivo azul claro.
  • Gomori: Fibras musculares y citoplasma celulares rojo, colágeno, cartílago y membrana basal verde, núcleos azul negruzco.

Fibras Elásticas

Se utilizan técnicas como la hematoxilina férrica de Verhoeff y la Orceína.

Fibras de Reticulina

Se utiliza la impregnación argéntica, que puede ser histoquímica o físico-química.