Fundamentos de Biología Molecular: Purificación de Plásmidos, Calidad de Ácidos Nucleicos e Hibridación
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Purificación de Plásmidos
Los plásmidos son muy útiles en el ámbito del ADN recombinante, donde se emplean como vectores para clonar secuencias genéticas. El principal desafío radica en su purificación, ya que es necesario separarlos del ADN cromosómico bacteriano y del ARN bacteriano. Para ello, se utilizan dos técnicas principales:
Centrifugación en Gradiente de Densidad
Esta técnica se basa en la diferencia de densidad de ambos tipos de moléculas. Una vez purificado el ADN bacteriano, se somete a una ultracentrifugación en cloruro de cesio. Dado que el ADN plasmídico y el ADN cromosómico tienen densidades diferentes, esto permite su separación en bandas diferenciadas.
Lisis Alcalina
Esta técnica se basa en las diferencias en
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