Secuenciación de ADN: Principios, Métodos y Evolución Tecnológica
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Método de Sanger
El Método de Sanger, también conocido como secuenciación por terminación de cadena, emplea la reacción de la ADN polimerasa y es la base de muchos métodos automatizados. Sin embargo, sigue limitado a secuencias relativamente pequeñas. Para esta técnica, se marcan los cebadores con 32P y se preparan cuatro tubos. Cada tubo contiene la muestra de ADN, ADN polimerasa, cebadores y los cuatro tipos de nucleótidos (dATP, dCTP, dGTP, dTTP). En cada tubo, uno de los tipos de nucleótidos se encuentra en una pequeña proporción (aproximadamente 1/200) en una forma modificada (dideoxinucleótido o ddNTP) que actúa como terminador de cadena, ya que su extremo 3' no es reconocido por la ADN polimerasa para la adición de nucleótidos... Continuar leyendo "Secuenciación de ADN: Principios, Métodos y Evolución Tecnológica" »
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