Guia de medis de cultiu i tècniques de sembra microbiològica

Classificació dels medis de cultiu segons l'aplicació

• Medis d'enriquiment: Afavoreixen el creixement d'uns microorganismes sobre els altres, de manera que, al final de la incubació, la població del microorganisme que volem aïllar és molt més gran que la dels altres, però no inhibeix totalment el creixement de la resta. Contenen additius com sang o extractes de teixits d'animals i plantes.
• Medis selectius: Afavoreixen el creixement d'un tipus o grups de microorganismes i inhibeixen el creixement de la resta presents a l'inòcul. Permeten l'aïllament del microorganisme buscat gràcies a substàncies inhibidores que només un tipus de microorganismes pot resistir.

Tècniques de sembra i inoculació

Conceptes bàsics

• Sembra o inoculació: Traspàs de mostra microbiana a un medi de cultiu.
• Resembra: Traspàs d'una colònia microbiana aïllada a un altre medi.
• Inòcul: Quantitat suficient i representativa del microorganisme problema.

Mètodes de sembra

1. Sembra en estria o ziga-zaga

1. Es diposita l'inòcul a l'extrem superior de la placa.
2. Es sembra amb la nansa de Kolle a partir de l'inòcul amb un moviment de ziga-zaga fins a l'altre extrem de la placa. La nansa no s'aixeca de la placa i només es flameja abans d'agafar l'inòcul i en finalitzar la sembra.
3. Al final de la placa i un cop incubat, s'obtindran colònies aïllades.

2. Sembra en estria múltiple

1. Es diposita l'inòcul en un extrem de la placa amb la nansa de Kolle de punta rodona flamejada.
2. Amb la mateixa nansa es fa un ziga-zaga en un marge de la placa.
3. Es fa un nou tram començant a l'extrem del tram anterior i es segueix traçant una espiral amb els diferents trams, flamejant la nansa entre tram i tram.
4. L'últim tram s'efectua cap a l'interior. Cada cop les colònies són més aïllades.

3. Sembra per quatre quadrants

1. Es divideix la placa en quatre quadrants (es pot retolar a la part posterior).
2. Es diposita l'inòcul en l'extrem superior d'un dels quadrants i es sembra en ziga-zaga.
3. Sense flamejar la nansa, es realitza la mateixa operació en els altres quadrants. A cadascun dels quadrants es sembra l'inòcul que queda adherit després de la sembra anterior.

4. Sembra per tres girs

1. Es sembra per estria o ziga-zaga la meitat de la placa.
2. Es flameja la nansa.
3. Es gira la placa 90º sembrant en estria la meitat superior de la mateixa.
4. Es torna a girar i es repeteix l'operació. Les colònies aïllades es troben en la zona sembrada en últim lloc.