Métodos de muestreo de agentes biológicos y metabolitos en el aire y matrices líquidas

Métodos que ponen de manifiesto el número total:

1. Métodos para el muestreo aéreo de agentes biológicos cultivables

Proyectos para determinar la fuente, cantidad e identificación de agentes biológicos transmitidos por el aire. Los métodos están basados en la toma, recuperación y cultivo microbiano.

Gravitación

Es la forma más simple. Las partículas biológicas son recogidas por gravedad sobre una superficie adherente. Los resultados no son cuantitativos.

Impactación

El aire, aspirado por una bomba, pasa a través de orificios y es dirigido a una superficie de medio de cultivo en una placa, que debe incubarse a la temperatura adecuada. El recuento se expresa en UFC/m³. El muestreador en cascada o Andersen toma muestras en serie con 6 placas, reteniendo por orden decreciente de tamaño.

Centrifugación

Utilizan la fuerza centrífuga como ayuda para separar las partículas de la corriente de aspiración. Los agentes biológicos son impulsados por las aspas del ventilador hasta el medio de cultivo contenido en una tira.

Burbujeo

El aire a muestrear pasa a través de un volumen conocido de líquido. En una alícuota del líquido se procede al recuento por siembra directa y otro por tinción.

Filtración

El aire es aspirado a través de un filtro en el cual las partículas biológicas se depositan.

2. Además del muestreo aéreo

Se puede determinar el número de agentes biológicos depositados en superficies, con unas torundas de algodón en placa tipo RODAC (UFC/cm²).

3. Muestreo en matrices líquidas

La toma se realiza directamente, dispensándose en el medio adecuado, o reteniéndolos en filtros (UFC/mL).

Métodos que ponen de manifiesto la presencia de elementos celulares:

Endotoxinas

Son componentes integrales de las bacterias Gram negativas, producen reacciones tóxicas y procesos inflamatorios. El método se basa en la activación que las endotoxinas producen en una enzima de la coagulación presente en el lisado del amebocito del cangrejo.

Glucanos y ergosterol

Son marcadores de contaminación fúngica en el aire y causan enfermedades crónicas. Las muestras de aire se toman en filtros con posterior análisis por el método LAL.

Métodos que cuantifican metabolitos:

• Análisis de ATP
• Estudio de metabolitos secundarios: micotoxinas y aflatoxinas.

Técnicas para contaminantes químicos

• CO e hidrocarburos: absorción infrarroja, cromatografía de gases con detector de ionización de llama.
• SO₂: absorción infrarroja, detector de ionización de llama, cromatografía de gases con detector de ionización de llama, colorimétrico (método de pararrosanilina: SO₂ + tetracloromercurato = diclorosulfito de mercurio; diclorosulfito + pararrosanilina = ácido metilsulfónico de pararrosanilina, púrpura a 548 nm).
• NOx: absorción infrarroja, quimioluminiscencia, colorimétrico (Griess-Saltzman: NO₂ + ácido sulfanílico = sal de diazonio; sal de diazonio + N-(1-naftil)etilendiamina = colorante azoico violeta oscuro).