Diagnóstico serológico: técnicas, interpretación de IgM, IgG y avidez, e hipersensibilidad
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Diagnóstico serológico
El diagnóstico serológico es un método indirecto que permite detectar la presencia de un agente infeccioso basándose en la respuesta del organismo.
Memoria inmunológica
En el sistema de defensas específico, la formación de anticuerpos crea una respuesta que deja un recuerdo del contacto.
Característica: especificidad.
Problema diagnóstico
Los anticuerpos pueden corresponder a enfermedades pasadas o en curación. La IgM indica infección en fase aguda, mientras que la IgG aparece tras 3-6 semanas.
Toma de muestras
Se deben tomar 2 muestras en periodos de 2 semanas:
- La IgM aumenta en la infección aguda.
- La IgG baja en la fase de curación.
Seroconversión
Es la variación en la tasa de anticuerpos entre ambas muestras.
Técnicas empleadas
Los avances en anticuerpos monoclonales mejoran la velocidad y reducen los utensilios y muestras necesarios. Se obtienen mediante biología molecular, y también se utilizan anticuerpos recombinantes.
Entre las técnicas empleadas se encuentran:
- Inmunofluorescencia directa
- Aglutinación en látex
- Hemaglutinación
- Pruebas de inmunidad
- Precipitación
- Enzimoinmunoensayo (ELISA)
- Inmunocromatografía
Determinación de IgM
Se utilizan inmunoglobulinas marcadas que reconocen alguna parte de estas moléculas, ya que el fragmento Fc de cada inmunoglobulina es diferente. Para ello se corta con papaína con el fin de emplearlo como antígeno. Inoculando un animal con fragmento Fc de IgG se producirán anticuerpos frente a ella.
Avidez de IgG
Se detecta mediante ELISA por duplicado. Se emplea una sustancia desestabilizadora de la unión entre IgG y antígeno, como la urea:
- Positivo en una y negativo con urea: IgG de baja afinidad, infección reciente.
- Positivo en ambas: IgG de alta afinidad, infección producida tiempo atrás.
Resultados
- Cualitativo: estudio epidemiológico.
- Cuantitativo: diagnóstico clínico (título de suero).
En el paciente se determina la tasa de anticuerpos en 2 muestras para observar la seroconversión y saber si está en fase aguda (+ anticuerpos), en curación (- anticuerpos) o con inmunización previa (= anticuerpos).
Criterio de infección
Un aumento del título de 4 veces, o un aumento entre una muestra recogida en fase aguda y otra durante la convalecencia, o la presencia de IgM específica, indica infección.
Técnicas de detección
- ELISA o inmunofluorescencia (determinan IgM o IgG).
- Aglutinación o fijación del complemento (anticuerpos totales).
- PCR o inmunoblot (anticuerpos totales).
Unidades e interpretación
- Unidades SI: se compara la muestra con un patrón.
- Índice: coeficiente entre el valor de la muestra y el calibrador. Cualquier índice superior a 1 es positivo (+ índice = + anticuerpos).
Hipersensibilidad
La hipersensibilidad es una reacción inmunológica excesiva frente a un antígeno que provoca daño en los tejidos.
Clasificación
- Tipo I: reagínica o alergia.
- Tipo II: citotóxica.
- Tipo III: mediada por complejos inmunes.
- Tipo IV: mediada por células.
- Tipo V: estimuladora.