Protocolo de Pruebas Cruzadas y Compatibilidad Sanguínea en Medicina Transfusional

Pruebas de Compatibilidad Sanguínea

El objetivo principal de las pruebas de compatibilidad es seleccionar el componente sanguíneo con el mínimo riesgo para el paciente, buscando la presencia de anticuerpos libres en suero.

• Prueba Cruzada Mayor: Enfrenta el suero del receptor con los eritrocitos del donante.
• Prueba Cruzada Menor: Enfrenta el plasma del donante con los eritrocitos del receptor.
• Autocontrol: Enfrenta el suero o plasma del receptor con sus propios eritrocitos.

Prueba Mayor: Procedimiento Detallado

Esta prueba es fundamental para detectar incompatibilidades antes de la transfusión:

• Se utilizan dos gotas de suero del receptor y una gota de hematíes lavados del donante.
• Se realiza un escrutinio de anticuerpos irregulares en el receptor.
• Los hematíes y el suero se incuban para permitir la reacción de anticuerpos poco potentes.
• Es necesario añadir suero antiglobulina tras la incubación para detectar anticuerpos que recubren los hematíes sin aglutinarlos visiblemente.
• La suspensión de hematíes se prepara a partir de los segmentos de la bolsa (macarrones).

Preparación de la Muestra (Técnica de Lavado)

Para asegurar la precisión, se deben eliminar interferencias como la fibrina y proteínas plasmáticas:

1. Obtener una muestra de sangre de la bolsa del donante.
2. Lavar los glóbulos rojos con solución salina (3 a 4 veces) hasta que el sobrenadante sea transparente.
3. Centrifugar y decantar el sobrenadante en cada lavado.
4. Preparar una suspensión al 5% (1 gota de glóbulos rojos lavados en 19 gotas de solución salina).

Preparación del Receptor

1. Centrifugar la muestra de sangre del receptor.
2. Decantar los eritrocitos para obtener el plasma, que contiene los anticuerpos necesarios para la prueba.

Fases de la Prueba de Compatibilidad

Fase I

• Preparar hematíes al 5%.
• Mezclar 2 gotas de suero del receptor con 1 gota de suspensión de hematíes.
• Centrifugar 15 segundos a 3400 RPM (o 1 minuto a 1000 RPM).

Fase II

• Añadir 2 gotas de albúmina bovina, mezclar e incubar a 37°C por 15-30 minutos.
• Observar hemólisis o aglutinación.

Fase III

• Lavar 4 veces con solución salina fisiológica (SSF).
• Añadir 2 gotas de antiglobulina humana (AGH) y mezclar.
• Si el resultado es negativo, añadir 1 gota de células control de Coombs (CCC) para validar la prueba.

Prueba Menor

Consiste en enfrentar dos gotas de suero o plasma del donante con una gota de eritrocitos del receptor.

Interpretación de Resultados

Prueba Positiva

La aglutinación indica incompatibilidad. Se debe realizar un autocontrol para diferenciar entre aloanticuerpos y autoanticuerpos:

• Si el autocontrol es negativo, se sospecha de aloanticuerpos.
• Si el autocontrol es positivo, se sospecha de autoanticuerpos.
• Los aloanticuerpos suelen generar reacciones transfusionales más graves.

Prueba Negativa

La prueba es compatible, lo que indica la ausencia de aloanticuerpos eritrocitarios detectables en el suero del receptor.