Manual de Identificación Bacteriana y Técnicas de Laboratorio Clínico

Principales Patógenos Bacterianos

Staphylococcus aureus

• Identificación: Coco GP en racimos, coagulasa +.
• Características: Anaerobio facultativo, catalasa +, microbiota piel/nariz, resistente ambiental, posible SARM.
• Cultivo: Agar sangre (colonias doradas beta); agar sal manitol (amarillo).
• Pruebas clave: GP, catalasa +, coagulasa +, manitol +.
• Infecciones: Cutáneas, neumonía, bacteriemia, endocarditis, intoxicación alimentaria.

Streptococcus pyogenes

• Identificación: Coco GP en cadenas, grupo A.
• Características: Anaerobio facultativo, catalasa −, beta-hemolítico.
• Pruebas clave: PYR +, sensible a bacitracina.
• Infecciones: Faringitis, escarlatina, impétigo, fascitis necrosante.

Streptococcus pneumoniae

• Identificación: Diplococo GP encapsulado, alfa-hemolítico.
• Pruebas clave: Optoquina sensible, soluble en bilis.
• Infecciones: Neumonía, meningitis, otitis media.

Enterococcus faecalis

• Identificación: Coco GP, gamma-hemolítico.
• Características: Crece en NaCl 6,5%, resistente ambiental.
• Pruebas clave: Bilis-esculina +, catalasa −.

Escherichia coli

• Identificación: Bacilo GN, enterobacteria.
• Características: Anaerobio facultativo, lactosa +.
• Cultivo: MacConkey (rosado), EMB (brillo verde).
• Pruebas clave: Oxidasa −, indol +, IMVIC ++--.

Salmonella spp.

• Identificación: Bacilo GN, lactosa −, móvil.
• Pruebas clave: H2S +, TSI K/A + H2S, oxidasa −.

Pseudomonas aeruginosa

• Identificación: Bacilo GN no fermentador.
• Características: Aerobio estricto, oxidasa +.
• Claves: Olor afrutado, pigmento azul-verde.

Neisseria meningitidis

• Identificación: Diplococo GN encapsulado.
• Pruebas clave: Oxidasa +, catalasa +, glucosa +, maltosa +.

Mycobacterium tuberculosis

• Identificación: BAAR (Bacilo Ácido-Alcohol Resistente).
• Pruebas clave: Ziehl-Neelsen +, ácidos micólicos en pared.

Clostridioides difficile

• Identificación: Bacilo GP anaerobio esporulado.
• Características: Toxinas A y B.
• Infección: Colitis pseudomembranosa.

Fundamentos de Diagnóstico Microbiológico

Tinción de Gram

Clasifica según la pared celular: GP (pared gruesa, morado) vs GN (pared fina + LPS, rosa).

Pruebas Bioquímicas Esenciales

• Catalasa: Diferencia Staphylococcus (+) de Streptococcus (−).
• Coagulasa: Identifica S. aureus.
• Oxidasa: Separa fermentadores de no fermentadores.
• IMVIC: Conjunto de pruebas (Indol, Rojo metilo, Voges-Proskauer, Citrato) para enterobacterias.
• TSI: Evalúa fermentación de azúcares, gas y producción de H2S.

Sistemas de Identificación

• Galerías manuales: Basadas en sustratos bioquímicos.
• Sistemas automatizados: MicroScan®, Vitek®, ATB®.
• MALDI-TOF: Espectrometría de masas que identifica el espectro proteico único de cada microorganismo.

Técnicas de Cultivo y Siembra

Consideraciones de Siembra

• Aislamiento por agotamiento: Método de cuatro cuadrantes para obtener colonias aisladas.
• Siembra masiva: Útil para recuento y antibiogramas.
• Picadura: Para estudiar movilidad y metabolismo anaerobio.

Incubación

La atmósfera (aerobia, capnófila, microaerófila o anaerobia) y la temperatura (habitualmente 35–37 °C) son críticas para el crecimiento bacteriano.

Recuento Bacteriano

Expresado en UFC/ml. Se puede realizar mediante diluciones seriadas, filtración o métodos estimativos como la escala de McFarland.