Microbiología básica: medios de cultivo, pruebas bioquímicas y bacterias de interés clínico

Resumen

Este documento repasa los fundamentos de la microbiología de laboratorio: los factores de crecimiento bacteriano, los tipos de medios de cultivo y los indicadores de pH. Explica las pruebas bioquímicas más habituales (TSI, LIA, citrato, urea, motilidad, catalasa) y presenta los grupos de enterobacterias y cocos Gram positivos con sus infecciones principales. Incluye también la tinción de Gram y la diferencia entre bacterias Gram positivas y Gram negativas.

Puntos clave

Los factores de crecimiento bacteriano incluyen fuentes de nitrógeno (peptona), de carbono y energía (glucosa, lactosa o sacarosa) y vitaminas y lípidos (extracto de levadura).
Los indicadores de pH cambian de color al producirse fermentación, lo que permite identificar este proceso.
El medio TSI evalúa cinco pruebas: fermentación de glucosa, lactosa y sacarosa, producción de gas y producción de H₂S.
La tinción de Gram usa cristal violeta como colorante primario, lugol como mordiente, alcohol/acetona como decolorante y safranina como contraste.
Las bacterias Gram positivas tienen pared gruesa con mucho peptidoglucano y no poseen membrana externa; las Gram negativas tienen pared delgada y membrana externa.
Streptococcus pyogenes puede causar faringitis y escarlatina, y como complicaciones fiebre reumática y glomerulonefritis; Staphylococcus aureus causa forúnculos, abscesos, neumonía y sepsis, entre otras infecciones.

Resumen generado con IA a partir del documento. Ponte a prueba

Factores de Crecimiento Bacteriano

Aminoácidos / Nitrógeno: Peptona.
Carbono y energía: Glucosa (también lactosa o sacarosa).
Vitaminas y lípidos: Extracto de levadura.

Indicadores en Medios de Cultivo

Detectan cambios de pH mediante viraje de color, lo cual permite identificar procesos de fermentación.

Pruebas de Identificación Bioquímica

Medio TSI (5 pruebas)

Fermentación de glucosa.
Fermentación de lactosa.
Fermentación de sacarosa.
Producción de gas.
Producción de H₂S.

Medio LIA

Enzima: Descarboxilasa de lisina.

Otras Pruebas

Citrato de Simmons: Usa citrato como fuente de carbono; cambia de verde a azul si es positivo.
Urea: Detecta ureasa, la cual produce amoniaco.
Motilidad (HIO): Turbidez indica movilidad; crecimiento en línea recta indica inmovilidad.
Prueba de Catalasa: Detecta la enzima catalasa (presencia de burbujas con H₂O₂).

Enterobacterias

Bacilos Gram negativos del intestino.

Géneros importantes:

Escherichia coli
Salmonella typhi
Shigella dysenteriae
Klebsiella pneumoniae
Enterobacter cloacae
Proteus mirabilis
Serratia marcescens

Hábitat: Intestino grueso (colon).

Microbiología Clínica: Cocos Gram Positivos

Staphylococcus

S. aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
S. haemolyticus

Streptococcus

S. pyogenes (Grupo A)
S. agalactiae (Grupo B)
S. pneumoniae
S. viridans

Pruebas Bioquímicas para Staphylococcus

Tinción de Gram
Catalasa
Coagulasa
Fermentación de manitol
DNasa
Novobiocina

Infecciones Principales

Streptococcus pyogenes: Faringitis, escarlatina, celulitis, erisipela. Complicaciones: fiebre reumática, glomerulonefritis.
Staphylococcus aureus: Forúnculos, abscesos, impétigo, celulitis, neumonía, sepsis, intoxicación alimentaria y síndrome de piel escaldada.

Técnicas de Laboratorio y Conceptos Básicos

Tinción de Gram

Cristal violeta: Colorante primario.
Lugol: Mordiente.
Alcohol/acetona: Decolorante.
Safranina: Contraste (rosa en Gram –).

Conceptos Fundamentales

Bacteria: Microorganismo unicelular.
Célula procariota: Sin núcleo definido.
Medio de cultivo: Nutriente para el crecimiento bacteriano.
Agar: Gel solidificante.

Estructuras Bacterianas

Pared celular: Forma y protección.
Citoplasma: Sitio de reacciones metabólicas.
Ribosomas: Síntesis de proteínas.
ADN: Información genética.

Clasificación de Medios y Pared Celular

Tipos de Medios de Cultivo

Selectivo: MacConkey.
Diferencial: Sangre, MacConkey.
Enriquecido: Chocolate, Sangre.

Diferencias entre Gram (+) y Gram (–)

Gram (+): Pared gruesa, color morado, sin membrana externa, alto contenido de peptidoglucano, sensible a penicilina.
Gram (–): Pared delgada, color rosa, con membrana externa, poco peptidoglucano, mayor resistencia.

Preguntas frecuentes

¿Qué diferencia hay entre bacterias Gram positivas y Gram negativas?

Las Gram positivas tienen pared gruesa, color morado, sin membrana externa y alto contenido de peptidoglucano, además de ser sensibles a la penicilina. Las Gram negativas tienen pared delgada, color rosa, membrana externa, poco peptidoglucano y mayor resistencia.

¿Para qué sirve la prueba de la catalasa?

Detecta la presencia de la enzima catalasa, que se reconoce por la formación de burbujas al añadir H₂O₂.

¿Qué mide la prueba del citrato de Simmons?

Indica si la bacteria puede usar citrato como única fuente de carbono; el medio cambia de verde a azul cuando la prueba es positiva.