Enzimologia Clinica y Pruebas de Funcion Hepatica y Pancreatica

Factores que Afectan la Actividad Enzimatica y Temperatura

La actividad enzimática aumenta con el aumento de la temperatura, aclarando al mismo tiempo la inactivación (desnaturalización de la proteína). Cuanto más alta es la temperatura, más dominante es la inactivación.

pH y Concentración de Iones Hidrógeno: La actividad enzimática según la concentración de iones hidrógeno varía, ya que también se relaciona con las cargas superficiales de las moléculas, dado que cada enzima tiene su pH óptimo de trabajo.

Valores de Transaminasas en Infarto Agudo de Miocardio y Hepatitis

Infarto Agudo de Miocardio (IAM)

La GOT (AST) aumenta en suero luego de un IAM debido a su liberación al torrente sanguíneo, la cual es muy abundante en el miocardio. Ocurre por daño evidente del tejido cardíaco. Para observar elevaciones significativas de GPT (ALT) en suero en casos de IAM, la lesión debe ser muy severa.

Hepatitis

En la hepatitis también aumenta la GOT, aunque la GPT es la predominante. La GPT aumenta en suero debido a la necrosis hepatocelular.

Exámenes de Laboratorio en Ictericia

• Ictericia Hemolítica: Aumento de bilirrubina indirecta, sin aumento o leve aumento de bilirrubina directa, urobili y GOT/GPT normales.
• Ictericia Obstructiva: Transaminasas y fosfatasa alcalina aumentadas (a la semana vuelven a bajar); fosfatasa alcalina, GGT y bilirrubina siguen aumentadas; urobilinógeno disminuido y bilirrubina directa aumentada.

Pancreatitis Aguda: Enzimas, Evolución Temporal y Diagnóstico

Evaluación de las principales enzimas utilizadas en el diagnóstico de patologías pancreáticas:

Amilasa Sérica

• Producida por el páncreas, glándulas salivales y pulmón (no es específica del páncreas).
• Se eleva en el 85% de los casos de pancreatitis.
• Aumenta dentro de las primeras 24 horas, alcanza su pico máximo a las 20-30 horas y permanece elevada de 2 a 4 días.
• El grado de aumento no refleja la gravedad del cuadro clínico.
• Causas de valores normales: Su aumento es fugaz, el examen se toma tardíamente o se trata de una pancreatitis crónica recurrente.
• Macroamilasemia: Enfermedad inmune acompañada de hiperamilasemia, sin aumento de amilasa urinaria.

Amilasa Urinaria

Se eleva entre 6 y 10 horas después del aumento de la amilasa sérica, con una elevación persistente de 7 a 10 días. Se mide en orina de 24 horas (mayor valor informativo) y no se eleva en otras patologías.

Lipasa Sérica

Aumenta entre 3 y 6 horas después del brote agudo de pancreatitis. Se mantiene elevada por más tiempo (hasta 15 días). Se incrementa 2 veces su valor normal en pancreatitis aguda, presentando alta sensibilidad y especificidad, con una tasa de acierto del 98%.

Ventaja de la Lipasa Pancreática frente a la Amilasa

Es más específica que la amilasa en algunas enfermedades donde los niveles de esta última pueden aumentar y ocasionar incertidumbres diagnósticas, como en la macroamilasemia, parotiditis y carcinomas. También es útil en casos de presentación tardía a la consulta, ya que la vida media de la amilasa es de 2 días y la de la lipasa es de 5 a 8 días.

Pruebas de Malabsorción y Función Pancreática

Prueba de la D-Xilosa

Se administran 25 g de D-xilosa por vía bucal. Se absorbe en el duodeno y yeyuno proximal y es eliminada por el riñón. Se toma muestra de sangre a las 2 horas y se recolecta orina durante las 5 horas siguientes.

• Valores de referencia: Suero mayor a 25 mg/dl; orina, 16 a 33% de la dosis administrada en 5 horas.
• Una disminución en la absorción de D-xilosa indica mala absorción intestinal.

Prueba de Malabsorción de Grasas en Insuficiencia Pancreática

• Prueba de tolerancia a la vitamina A: Se administran 5 ml de vitamina A por vía oral y se mide en suero a las 3 y/o 6 horas. Valor normal: 30-65 ug/dl (pico 200-600 ug/dl a las 3-6 horas). Niveles bajos con intervalo normal sugieren insuficiencia pancreática. Se basa en que la vitamina A puede absorberse en grado importante solo si las grasas están hidrolizadas.
• Medición de absorción de trioleína y ácido oleico marcados con Yodo-131 administrados en días sucesivos. Si la absorción de ácido oleico es normal y la de trioleína es anormal, la función pancreática está disminuida. Si ambas son anormales, se sospecha un síndrome de malabsorción de origen no pancreático.

Prueba NBTPABA

Mide la actividad de la quimotripsina (capacidad secretora del páncreas). Este compuesto es hidrolizado por la quimotripsina a NBT y PABA, los cuales se absorben en el intestino, se conjugan en el hígado y se eliminan por la orina. Se puede medir en suero u orina tras su administración oral (sal sódica unida a NBT).

Mecanismos de Regulación Enzimática

Mecanismos que Controlan la Entrada y Salida de Enzimas

• Aumento de actividad enzimática: Necrosis celular, síntesis enzimática aumentada, daño de membrana, trastornos de secreción, producción aumentada de activadores o inhibidores.
• Disminución de actividad enzimática: Restricción en la síntesis, aumento de la degradación enzimática.

Isoenzimas de la Fosfatasa Alcalina (FA)

• Intestinal (FAI)
• Ósea (FAO)
• Hepática (FAH)
• Macromolecular (FAMM)

Coeficiente de Ritis

Es la relación entre la actividad de la GOT frente a la GPT en suero. El valor del cociente permite la evaluación del tipo de enfermedad hepática:

• Disminuido (menor a 0.7): Hepatitis vírica aguda y persistente, hígado graso leve.
• Alrededor de 0.7: Hepatitis reactiva, ictericia obstructiva antigua.
• Aumentado (mayor a 0.7): Cirrosis, hígado de estasis.
• Muy aumentado: Hígado con metástasis, cirrosis descompensada.

Consideraciones Clínicas Adicionales

• Enfermedad de Gilbert: Aumenta la bilirrubina no conjugada por falla a nivel del transporte desde la membrana sinusoidal a la región microsómica.
• Ictericia Fisiológica Neonatal: La causa principal es el déficit de glucuronil transferasa, lo que aumenta la bilirrubina no conjugada.
• Síndrome de Dubin-Johnson: Defecto a nivel del transporte desde el microsoma a los canalículos biliares, aumentando los niveles de bilirrubina conjugada.
• Kernicterus: Afección donde la bilirrubina se acumula en el sistema nervioso central (SNC), causando daños neurológicos severos.

Metodología de Mediciones Enzimáticas en el Laboratorio

Medida de 2 Puntos (Reacción Detenida)

Los participantes de la reacción son incubados en suero que contiene las enzimas durante un período fijo, al cabo del cual se interrumpe la reacción enzimática, midiendo ya sea la cantidad de sustrato no transformado o la cantidad de producto formado.

Medida Continua (Método Cinético)

La reacción enzimática es seguida en el fotómetro por la presencia de coenzimas (NADH o NADPH), las cuales absorben luz UV en su estado reducido, pero no en su estado oxidado. La muestra se incuba con todos los participantes de la reacción realizándose lecturas a intervalos regulares.