Técnicas citogenéticas y genómicas para detectar variaciones del ADN: FISH, microarrays, MLPA y GWAS
Hibridación fluorescente in situ (FISH)
Fluorescent in situ hybridization (FISH)
Descripción general: Técnica citogenética que detecta y localiza secuencias específicas de ADN e identifica y caracteriza variantes. Basada en el annealing del ADN (apareamiento con la cadena complementaria). El ADN se etiqueta con fluoróforos y, tras la hibridación, las sondas se visualizan en el microscopio de fluorescencia.
FISH tiene mayor resolución que el cariotipo con bandeo G para regiones concretas de cromosomas; no es eficiente para analizar todo el genoma (se usa para regiones dirigidas).
Proceso
- Se diseña y usa una sonda FISH fluorescente complementaria a la región de ADN de interés.
- Se cultivan células (si procede) y se detiene la mitosis en