Tipos de Microscopía Óptica: Fundamentos y Aplicaciones en Laboratorio
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Microscopía Óptica: Técnicas y Aplicaciones
Microscopía de campo oscuro
Se trata de una técnica microscópica en la que los especímenes observados se ven blancos y brillantes sobre un fondo oscuro. La iluminación de campo oscuro se puede realizar tanto mediante luz transmitida (trans-iluminación) como con luz incidente (epi-iluminación).
- Trans-iluminación: Permite obtener un campo de visión con una cantidad de luz importante, resaltando la estructura observada sobre un fondo muy iluminado.
- Epi-iluminación: El rayo de luz incide de manera oblicua sobre la muestra. La transparencia del objeto no es imprescindible. Como efecto de esta técnica, es posible obtener imágenes tridimensionales, complementando lo observado con la microscopía por trans-iluminación.
Microscopía de campo claro y contraste de fase
El microscopio de contraste de fase es especialmente útil para la observación de células vivas. Esta técnica intensifica el contraste de las estructuras celulares que apenas son visibles en el microscopio de luz transmitida corriente.
Microscopía de interferencia
El haz luminoso se divide antes de atravesar la muestra debido a la acción de un dispositivo optomecánico específico (difractor). El microscopio de interferencia también es particularmente apto para estudiar células vivas, pero también se puede usar en la observación de preparados inmunohistoquímicos.
Microscopía de fluorescencia
Pueden observarse estructuras celulares autofluorescentes o estructuras a las que se les unen fluorocromos. Una desventaja de esta técnica puede ser el rápido desvanecimiento de la imagen fluorescente.
Microscopía de polarización
La luz polarizada se utiliza en el microscopio de polarización para detectar y examinar estructuras muy bien ordenadas.
Videomicroscopía
Se realiza con la ayuda de una videocámara de gran resolución. La imagen visible en una pantalla puede manipularse electrónicamente. Es una técnica que puede aplicarse con eficacia a células vivas.
Microscopía láser confocal
Es un perfeccionamiento de la microscopía de fluorescencia. En ella, un haz láser barre el preparado y las imágenes obtenidas son procesadas electrónicamente. Las imágenes de los planos individuales pueden armarse técnicamente en una imagen tridimensional.