Tinciones hematológicas: tipos, métodos y colorantes para diagnóstico microscópico

Tinciones hematológicas

Definición: Conjunto de procesos que conducen a la coloración de las estructuras que componen las células sanguíneas. Su objetivo es aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea y permite, por tanto, que las células sean visualizadas microscópicamente con mayor facilidad.

Tipos de tinciones

Atendiendo al nivel de vitalidad de las células que se pretende colorear, se dividen en tinciones vitales y tinciones no vitales. Atendiendo al momento en que empezaron a ser utilizadas para el diagnóstico hematológico, se dividen en tinciones tradicionales y tinciones especiales.

Tinciones vitales

Aquellas que se practican sobre células que están vivas. Se efectúan mediante la introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo. Ej.: verde de Janus (verde jano), azul de metileno.

Tinciones no vitales

Aquellas que se realizan sobre células muertas. Requieren un proceso previo de fijación cuyo objetivo es conservar inalterada su estructura y adherirlas firmemente a la superficie del porta. La fijación puede realizarse mediante calor, aunque habitualmente se realiza con etanol o metanol.

Tinciones tradicionales

Se han logrado mediante el uso de colorantes que con frecuencia derivan de la anilina. Hay cuatro grupos principales:

• Colorantes ácidos: afinidad por las estructuras básicas o alcalinas de las células. Ej.: hemoglobina. El principal es la eosina.
• Colorantes básicos: afinidad por las estructuras ácidas de las células. Ej.: ácidos nucleicos. El principal es el azul de metileno.
• Colorantes neutros: sales de un ácido y de una base coloreados; tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Ej.: cosinato de azul de metileno.
• Colorantes indiferentes: no tienen afinidad por las estructuras ácidas o básicas, son insolubles en agua y tiñen sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante. Ej.: Sudan III, empleado para teñir las grasas.

Tinciones policrómicas: la idea de combinar colorantes fue desarrollada por Romanowsky. Existen variantes en la técnica:

• Panóptica: cuando se usan sucesivamente sustancias colorantes neutras.
• Pancrómica: cuando se aplican todas las sustancias colorantes neutras juntas.

Romanowsky: consta de un colorante ácido (eosina) y uno básico (tiazinas). Las tinciones de Wright y Giemsa son las más utilizadas en el diagnóstico hematológico.

Tinciones panópticas rápidas: producen una coloración fácil y rápida de las estructuras celulares.

Tinciones especiales

• Fluorescentes

  Se usan colorantes llamados fluorocromos (naranja de acridina, rojo neutro). Se fijan las células y, cuando se les proyecta luz ultravioleta, emiten radiación visible de un color característico.

• Citoquímicas

  Demuestran la presencia o ausencia de determinadas sustancias localizadas en el interior de los gránulos citoplasmáticos de los leucocitos; sirven para diferenciar unos tipos de leucemias de otros.