Tinciones hematológicas: tipos, métodos y colorantes para diagnóstico microscópico

Resumen

El texto explica qué son las tinciones hematológicas y su función de aumentar el contraste de las células sanguíneas para observarlas al microscopio. Describe la clasificación en tinciones vitales y no vitales, y en tradicionales y especiales, con sus colorantes principales. Incluye también las tinciones policrómicas de Romanowsky y las tinciones fluorescentes y citoquímicas.

Puntos clave

Las tinciones hematológicas aumentan el contraste entre las estructuras celulares y el medio para facilitar su observación microscópica.
Las tinciones vitales se aplican a células vivas introduciendo el colorante en la circulación; las no vitales se aplican a células fijadas y muertas.
La fijación de las tinciones no vitales se realiza habitualmente con etanol o metanol, aunque también puede hacerse con calor.
Los colorantes ácidos, como la eosina, tiñen estructuras básicas; los básicos, como el azul de metileno, tiñen estructuras ácidas.
Las tinciones de Wright y Giemsa, basadas en Romanowsky, son las más utilizadas en el diagnóstico hematológico.
Las tinciones citoquímicas ayudan a diferenciar tipos de leucemias según las sustancias de los gránulos de los leucocitos.

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Tinciones hematológicas

Definición: Conjunto de procesos que conducen a la coloración de las estructuras que componen las células sanguíneas. Su objetivo es aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea y permite, por tanto, que las células sean visualizadas microscópicamente con mayor facilidad.

Tipos de tinciones

Atendiendo al nivel de vitalidad de las células que se pretende colorear, se dividen en tinciones vitales y tinciones no vitales. Atendiendo al momento en que empezaron a ser utilizadas para el diagnóstico hematológico, se dividen en tinciones tradicionales y tinciones especiales.

Tinciones vitales

Aquellas que se practican sobre células que están vivas. Se efectúan mediante la introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo. Ej.: verde de Janus (verde jano), azul de metileno.

Tinciones no vitales

Aquellas que se realizan sobre células muertas. Requieren un proceso previo de fijación cuyo objetivo es conservar inalterada su estructura y adherirlas firmemente a la superficie del porta. La fijación puede realizarse mediante calor, aunque habitualmente se realiza con etanol o metanol.

Tinciones tradicionales

Se han logrado mediante el uso de colorantes que con frecuencia derivan de la anilina. Hay cuatro grupos principales:

Colorantes ácidos: afinidad por las estructuras básicas o alcalinas de las células. Ej.: hemoglobina. El principal es la eosina.
Colorantes básicos: afinidad por las estructuras ácidas de las células. Ej.: ácidos nucleicos. El principal es el azul de metileno.
Colorantes neutros: sales de un ácido y de una base coloreados; tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Ej.: cosinato de azul de metileno.
Colorantes indiferentes: no tienen afinidad por las estructuras ácidas o básicas, son insolubles en agua y tiñen sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante. Ej.: Sudan III, empleado para teñir las grasas.

Tinciones policrómicas: la idea de combinar colorantes fue desarrollada por Romanowsky. Existen variantes en la técnica:

Panóptica: cuando se usan sucesivamente sustancias colorantes neutras.
Pancrómica: cuando se aplican todas las sustancias colorantes neutras juntas.

Romanowsky: consta de un colorante ácido (eosina) y uno básico (tiazinas). Las tinciones de Wright y Giemsa son las más utilizadas en el diagnóstico hematológico.

Tinciones panópticas rápidas: producen una coloración fácil y rápida de las estructuras celulares.

Tinciones especiales

Fluorescentes
Se usan colorantes llamados fluorocromos (naranja de acridina, rojo neutro). Se fijan las células y, cuando se les proyecta luz ultravioleta, emiten radiación visible de un color característico.
Citoquímicas
Demuestran la presencia o ausencia de determinadas sustancias localizadas en el interior de los gránulos citoplasmáticos de los leucocitos; sirven para diferenciar unos tipos de leucemias de otros.

Preguntas frecuentes

¿Qué diferencia hay entre tinciones vitales y no vitales?

Las tinciones vitales se practican sobre células vivas, introduciendo el colorante en la circulación de un organismo. Las no vitales se realizan sobre células muertas y requieren una fijación previa para conservar su estructura.

¿Cuáles son las tinciones más utilizadas en diagnóstico hematológico?

Según el texto, las tinciones de Wright y Giemsa son las más utilizadas en el diagnóstico hematológico. Ambas pertenecen al grupo de las tinciones policrómicas de Romanowsky.

¿Para qué sirven las tinciones citoquímicas?

Sirven para demostrar la presencia o ausencia de determinadas sustancias en los gránulos citoplasmáticos de los leucocitos. Con ello permiten diferenciar unos tipos de leucemias de otros.