Técnicas de purificación y análisis en Biología Molecular y Celular

1. ¿Qué tipos de muestras son las más habituales en BMC?

Sangre, cultivos celulares, tejidos animales o vegetales frescos, tejidos fijados en formol e incluidos en parafina y otras muestras como esputos, células de la mucosa oral, bacterias y levaduras.

2. ¿Cuál es el cociente de pureza de AANN?

A260/A280

3. Fundamento de la cromatografía de intercambio iónico:

Se basa en la unión electrostática reversible de iones en solución a grupos funcionales cargados que están unidos covalentemente a una fase estacionaria.

4. Verdadero o falso, sobre la purificación de ARN, ¿es sensible a las ARNasas?

Verdadero

5. Verdadero o falso, en la cromatografía iónica la unión grupo-funcional es irreversible.

Falso, es reversible.

6. Dos procesos implicados en la extracción de los AANN:

Lisis celular para liberarlos y la inactivación de nucleasas celulares para evitar la degradación de los AANN.

7. Para obtener AANN purificados, ¿qué tres fases hay?

• Pretratamiento de la muestra.
• Extracción de los AANN
• Purificación de los AANN

8. Función de los detergentes y nombra uno.

Su función es desestructurar la bicapa lipídica de las membranas y desnaturalizar las proteínas que se insertan en ella. Se usa el SDS (dodecil-sulfato-sódico).

9. El cociente 260/280 se obtiene para:

a) Valorar AANN.
b) Medir ADN.
c) Pureza de AANN.
d) Medir turbidez.

10. ¿Qué dos técnicas se usan para la purificación de plásmidos?

Lisis alcalina y la centrifugación en gradiente de densidad.

11. Completa:

Las ARNasas son enzimas muy resistentes presentes en las superficies y materiales como consecuencia por contaminación de bacterias, hongos y células de descamación de la piel.

12. Enzimas específicas para dirigirse a los componentes de la pared:

a) Lisozimas y liticasas.
b) Endocimas y proteasas.
c) Lisostafin y zimolasa.
d) A y C son correctas

13. ¿En qué se basa la purificación con solventes orgánicos?

Se basa en la distinta solubilidad de los compuestos que integran el lisado celular en solventes orgánicos.

14. ¿Qué pretratamiento utilizarías para tejidos vegetales para la extracción y purificación de los AANN?

Homogeneización mecánica automatizada, mecánica manual con mortero y homogeneización química.

15. ¿Por qué están formadas las suspensiones celulares?

Por células libres y agregados celulares que flotan dispersos en el seno de un medio líquido.

16. V o F, el esputo puede usarse como material de partida para detectar o verificar presencia de inflamaciones cutáneas:

Falso, infecciones respiratorias.

17. El EDTA:

a) Inhibe la actividad de ADNasas.
b) Inhibe la actividad de ARNasas.
c) Promueve la actividad de ADNasas.
d) Promueve la actividad de ARNasas.

18. Componente celular y líquido de la sangre:

Componente celular constituido pro hematíes, leucocitos y plaquetas y el líquido es el plasma.