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Pruebas Hematológicas en el Laboratorio Clínico: Recuento Celular, Hemoglobina, Hematocrito y Coagulación

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Pruebas Hematológicas en el Laboratorio Clínico

A continuación se describen los principales procedimientos de hematología utilizados en el laboratorio clínico, junto con sus técnicas, cálculos y valores de referencia.

Recuento de Eritrocitos (Hematíes)

Material: pipeta diluidora Thoma roja.

  • Se enrasa a 0,5 y se rellena con reactivo.
  • Se cuenta en el cuadro central.

Cálculo: RBC = H x 5 x 10 x D

Valores de referencia:

  • Mujer: 4-5 millones/mm³
  • Hombre: 4,5-6 millones/mm³

Alteraciones: poliglobulia (aumento) y anemia (disminución).

Recuento de Leucocitos (Glóbulos Blancos)

Material: pipeta Thoma azul.

  • Se enrasa a 1 y se rellena con reactivo.
  • Los leucocitos se observan como puntos negros.
  • Se cuenta en el cuadro central.

Cálculo: WBC = (L / 4) x 10 x D (resultado en /mm³)

Valor de referencia: 4.000-11.000/mm³

Alteraciones: leucocitosis (aumento) y leucopenia (disminución).

Recuento de Plaquetas

Material: pipeta Thoma roja.

  • Llenar hasta 1 y rellenar con reactivo.
  • Contar 16 cuadros.

Cálculos:

  • C x 10 x 100 = nº de plaquetas/mm³
  • C x 1000 x 10⁶ = nº de plaquetas/L

Como alternativa, la muestra puede introducirse en el contador automático; el primer resultado corresponde al número que da el contador (error máximo del 20 %).

Valor de referencia: 130.000-400.000/mm³

Alteraciones: trombocitosis (aumento) y trombocitopenia (disminución).

Determinación de la Concentración de Hemoglobina

Reactivos: reactivo de Drabkin (4,9 ml de agua destilada + 2 gotas) y control.

Procedimiento:

  1. Usar el micrométodo.
  2. Incubar en el espectrofotómetro.
  3. Limpiar y llenar las cubetas hasta la mitad, con el lado liso orientado hacia la luz.
  4. Ajustar el espectrofotómetro: dar 100, Enter, programa 4, Enter; colocar la cubeta B y dar 0.

Cálculo: (muestra / estándar) x Hb = g/dl (Hb del estándar = 15 g/dl)

Determinación del Hematocrito

Se utiliza un capilar; la diferencia entre ambos capilares no debe superar el 2 %. Se mide entre los dos y ese es el valor final.

Valores de referencia (HTO):

  • Mujer: 37-40 %
  • Hombre: 42-50 %

El valor indica el número de hematíes. Alteraciones: enfermedad pulmonar (aumento) y anemia (disminución).

Fórmula Leucocitaria

Procedimiento: realizar una extensión teñida y contar 100 leucocitos. Introducir la muestra en el contador para el WBC.

Cálculo: Nº total de leucocitos por tipo = (WBC x % del tipo) / 100

Valores de referencia:

  • Neutrófilos segmentados: 40-75 %
  • Neutrófilos en cayado: 3-5 %
  • Eosinófilos: 0-7 %
  • Basófilos: 0-1,8 %
  • Monocitos: 5-9,1 %
  • Linfocitos: 25-40 %

Índice de Schilling

Cálculo: Índice de Schilling = % de formas juveniles / % de segmentados (contar 100 células en extensión fina).

Interpretación:

  • Aumento de formas juveniles: desviación a la izquierda (neutrofilia).
  • Disminución de formas juveniles: desviación a la derecha (anemia).

Contador Automático

Sangre normal:

  1. Introducir el ID con los 4 últimos dígitos y pulsar Enter.
  2. Introducir el tubo por la parte trasera.
  3. El equipo aspira, analiza e imprime los resultados.

Sangre capilar:

  1. Ajustar el modo de medición (measmode) y pulsar el botón capilar.
  2. Colocar la cubeta y pulsar el botón correspondiente.
  3. Tomar una pipeta de 20 µl y verter la sangre en la cubeta.
  4. Homogeneizar, introducir en la máquina y esperar el análisis.

Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (APTT)

  1. Obtener el plasma y verterlo en una cubeta.
  2. Calentar la muestra.
  3. Tomar 100 µl y pasarlos a otra cubeta; añadir 100 µl del reactivo 1 y calentar.
  4. En el coagulómetro: reset 2, introducir el número, calibrar “no”, reset 1.
  5. Añadir 100 µl del reactivo 2, colocar la cubeta y soltar.

Valor: APTT paciente expresado en segundos, comparado con el APTT del plasma normal (pool).

Tiempo de Protrombina (TP)

  1. Tomar el tubo y verter la sangre hasta la marca.
  2. Mezclar.

Cálculo: Tasa de protrombina = TP del paciente (en segundos) / TP del plasma normal (pool, en segundos).

Determinación del Factor Rh (Grupo Sanguíneo)

Portaobjetos: suero anti-D y albúmina al 30 %. No homogeneizar.

Tubo: suero anti-D, albúmina al 30 % y solución salina al 0,9 %.

  1. Retirar el suero.
  2. Lavar los hematíes.
  3. Verter 0,5 ml de sangre en un tubo y completar con suero.
  4. Centrifugar 4 minutos a 2.000 rpm.
  5. Repetir el proceso 3 veces.

Lectura en portaobjetos: sección S (aglutinación + / – / +) y sección A (aglutinación – / – / +).

Interpretación:

  • Rh positivo: presencia de aglutinación.
  • Rh negativo: ausencia de aglutinación.

Lectura en tubo: la aglutinación positiva se observa como grumos; si no se forman grumos, el resultado es Rh negativo.

Índice de Arneth

Valor normal: entre 1,9 y 3.

Cálculo: IL = NL / NM, donde NL es el número de lóbulos contados y NM el número de neutrófilos observados (100).

Clasificación de los neutrófilos según el número de lóbulos:

  • Tipo 1: sin lobulación.
  • Tipo 2: con 2 lóbulos.
  • Tipo 3: con 3 lóbulos.
  • Tipo 4: con 4 lóbulos.
  • Tipo 5: con 5 lóbulos.

Interpretación:

  • Valor inferior a 1,9: desviación a la izquierda.
  • Valor superior a 3: desviación a la derecha.

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