Procedimientos para el Muestreo Microbiológico de Superficies
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Normas técnicas para el muestreo microbiológico
Es fundamental evitar el empleo inicial de medios selectivos, pues en ellos incluso los microorganismos que en condiciones normales crecerían con dificultad, o no lo harán en absoluto en caso de estar dañados, se verán inhibidos. Deben usarse medios generales o enriquecidos para los recuentos y recuperaciones, posponiendo el empleo de medios selectivos para etapas más avanzadas de la identificación.
En las técnicas denominadas "de lavado", el diluyente empleado debe ser agua de peptona taponada, que a 25 °C y durante dos horas como máximo permite una revivificación adecuada para todos los fines. No debe permitirse una prolongación del tiempo de revivificación porque las bacterias comenzarían a reproducirse y se obtendrían recuentos falsamente elevados.
Técnicas de impresión
Se basan en el empleo de un agar de contacto: es un medio de cultivo sólido que se oprime sobre la superficie (plana o casi plana) a estudiar y después se retira. Debido a la humedad de la superficie del agar, una parte notable de las bacterias, esporas y otra flora presente quedará adherida al mismo al retirarlo de la superficie estudiada. A continuación, se incuba el agar de contacto y se procede a un recuento de colonias.
Técnica de frotado
Consiste en el frotado sistemático de una porción medida de la superficie a estudiar con un hisopo de algodón. Después, el hisopo se deja reposar sumergido en un volumen conocido de agua de peptona y se agita a intervalos para que vaya desprendiendo los microorganismos que se le hayan adherido al frotar. Posteriormente, se siembran en superficie o en masa volúmenes de la suspensión en placas de agar estándar de recuento en placa. Se incuba, se realiza el recuento y se hacen los cálculos pertinentes.
Técnica de lavados
Suelen usarse para el recuento en superficies interiores de recipientes. Se introduce un volumen grande de agua de peptona en el recipiente a estudiar, se agita para lavar bien su interior y se extrae el agua de peptona. Se siembran alícuotas de esta agua de peptona en placas y se incuban para el recuento de aerobios mesófilos. Si es necesario, se realizan las diluciones adecuadas.