Micro lab 7
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la sangre esta libre de microorganismos, estos pueden alcanzar el torrente sanguíneo
por punciones venosas o arteriales con material contaminado
bacteremia: bacterias en la sangre
El hemocultivo: es el examen que permite verificar la presencia de bacterias en el torrente sanguíneo.
La cantidad de sangre a extraer estará dada de acuerdo al frasco a utilizar según:
·Hemocultivo Pediátrico 1 a 2 ml de sangre·
·Hemocultivo Adulto 5 a 10 ml de sangre según el volumen del caldo
·Hemocultivo Neonatal 0,5 a 1 ml de sangre
Toma de Muestra: La muestra debe obtenerse extremando las medidas de asepsia, en campo estéril y los contenedores deben llevarse de inmediato a la estufa de cultivo a 35ºC.
La sangre no debe coagularse: se emplean anticoagulantes se utiliza Sulfonato sódico de polianetol (SP) 0,03% actúa además como inhibidor del efecto bactericida natural del complemento y la acción fagocítica de los leucocitos. También se emplea Citrato de Sodio 0,12%, aunque según algunos autores podría inhibir el desarrollo de Cocaceas Gram Positivas.
Se mantienen en estudio de las muestras: por 7 días en estufa de cultivo a 35ºC antes de descartar desarrollo, cuando la sospecha es Endocarditis Bacteriana se mantiene el estudio por 14 días y en sospecha de Brucellosis se extiende hasta 21 días de incubación.
Géneros de afiliación incierta
Género Haemophilus : Son bacilos Gram Negativo pequeños, con tendencia al pleomorfismo. Requieren ciertos factores derivados de la sangre para su desarrollo in vitro. (Factores X y V).
Crecimiento en agar chocolate : contiene factor X, una ferroprotoporfirina termoestable derivada de la hemoglobina y factor V, también conocido como coenzima NAD, este factor es termolábil es producido por ciertas bacterias como Staphylococcus aureus.
Crecimiento en Agar nutritivo tendido: La cepa en estudio, con sospecha de Haemophilus se siembran en agar nutritivo a 35 °C
Prueba de satelitismo: la cepa en estudio se siembra profusamente, por estría, en media placa de agar sangre, con un alambre de inoculación se traza una única estría angosta de una cepa de Staphylococcus productor de NAD, atravesando el área donde se ha sembrado la cepa en estudio.
Después de 18 a 24 horas de incubación a 35 °C, en atmósfera de CO2 se pueden observar diminutas colonias de Haemophilus con aspecto de gotas de rocío adyacentes a las colonias de Staphylococcus.
LCR, Liquidos articulares y otros: Durante el curso de una enfermedad infecciosa pueden encontrarse en la sangre circulante patógenos como virus, hongos, parásitos y bacterias
líquido cefalorraquídeo, líquido articular, pleural Estos fluidos son estériles, pero en condiciones específicas pueden alcanzar microorganismos e infectarlos, provocando serias complicaciones
Neisseria meningitidis: carácter epidémico.
Prueba de Citocromo oxidasa: determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromo-oxidasa// produce agua o peróxido de hidrógeno según la especie bacteriana// Se sugiere incluir controles, Control positivo (+) Pseudomona aeruginosa, Control negativo (-) E. coli.
Presencia de oxidasa va ligada a la producción de catalasa, ya que ésta degrada el peróxido de hidrógeno que se produce como consecuencia de la reducción del oxígeno
Medio de Thayer Martin: formulado especialmente para el aislamiento selectivo de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis a partir de material clínico sospechoso
Se utiliza medio C.T.A: promueve el desarrollo de microorganismos existente, al cual se le añaden carbohidratos a una concentración del 1%, // rojo a color amarillo se interpreta como reacción (+).