Inmunoensayos: Técnicas y Aplicaciones en el Diagnóstico
Enviado por Chuletator online y clasificado en Medicina y Salud
Escrito el en 
español con un tamaño de 2,32 KB
Inmunoensayos: Técnicas y Aplicaciones en el Diagnóstico
Diferencias entre Reacciones Ag-Ac Primarias y Secundarias
Las reacciones ag-ac primarias no producen manifestaciones visibles, requiriendo sistemas de revelado adicionales. Las reacciones ag-ac secundarias, por otro lado, permiten la detección directa de los resultados.
Inmunoensayos Enzimáticos Multiplicados
Utilizan una enzima conjugada con el analito como marcador. Permiten determinar la interacción entre el analito y el ac o ag complementario. Se emplean para detectar drogas y proteínas en suero y orina, siendo el analito generalmente un antígeno.
Tapizado y Conjugación en ELISA
El tapizado es la adsorción de ag o ac al soporte, generalmente mediante dilución en tampón carbonato. La conjugación es la unión de ag o ac con una enzima marcadora, utilizando agentes puente como glutaraldehído o m-peryodato sódico.
Procedimiento ELISA Directa para Detección de Antígenos
- Tapizado: Fijación de la muestra al soporte y lavado.
- Adición de anticuerpos conjugados específicos.
- Incubación y lavado.
- Adición del sustrato enzimático.
- Incubación y desarrollo de color.
- Frenado de la reacción.
- Lectura visual y espectrofotométrica.
Trazadores en Radioinmunoensayos (RIA)
Los RIA utilizan isótopos radiactivos como marcadores, denominados trazadores. Se basan en la inhibición competitiva de la unión de un antígeno radiactivo a su anticuerpo específico.
Inmunoensayos Quimioluminiscentes
Utilizan sustratos que emiten luz al reaccionar con la enzima. La emisión se mide con un luminómetro. Ofrecen mayor sensibilidad que las reacciones colorimétricas.
Técnica DOT-ELISA
Es un método no competitivo y heterogéneo para detectar proteínas sobre nitrocelulosa, utilizando anticuerpos marcados con enzimas. La presencia de anticuerpos se visualiza como una coloración en la zona del antígeno.
Fases de la Inmunotransferencia
- Separación de proteínas mediante electroforesis SDS-PAGE.
- Transferencia de las proteínas a un soporte.
- Reconocimiento de las proteínas mediante una técnica inmunoenzimática.