Fundamentos de Cromatografía y Electroforesis: Técnicas de Separación
Enviado por Chuletator online y clasificado en Diseño e Ingeniería
Escrito el en 
español con un tamaño de 2,61 KB
Desventajas de la Cromatografía en Columna
- Requiere grandes cantidades de fase móvil.
- Tiempos de proceso lentos.
- Columnas de gran longitud (5 cm a 1 m).
Características del Sistema de Bombeo en HPLC
- Resistencia a la corrosión por solventes.
- Facilidad de manejo y mantenimiento.
- Compatibilidad con una amplia gama de solventes.
Parámetros Técnicos en Columnas de HPLC
Los intervalos estándar para las columnas son:
- Longitud: 10 cm, 12.5 cm, 15 cm.
- Diámetro: 4.6 mm, 6.2 mm, 9 mm.
- Tamaño de partícula (soporte): 10 µm, 5 µm, 4 µm, 3 µm.
Detectores en HPLC y sus Aplicaciones
| Detector | Aplicación principal |
|---|---|
| UV/Vis | Detector de uso general y mayor número de aplicaciones. |
| Fluorescencia | Identificación y cuantificación de micotoxinas. |
| Conductividad | Identificación de aniones y compuestos iónicos. |
| Índice de refracción | Cuantificación de lípidos y carbohidratos. |
| Arreglo de diodos (DAD/PDA) | Obtención del espectro de absorción. |
| Espectrómetro de masas (MS) | Identificación de la estructura molecular. |
Fundamentos de Electroforesis
La electroforesis es una técnica de separación de moléculas iónicas basada en su carga y masa dentro de un campo eléctrico (Eq = Fv).
Parámetros que influyen en la movilidad electroforética
- pH
- Temperatura
- Viscosidad
- Campo eléctrico
- Fuerza iónica
Métodos de detección en electroforesis
- Colorante para proteínas: Ninhidrina y Azul de Coomassie.
- Colorante para ácidos nucleicos: Bromuro de etidio.
Equipamiento y Aplicaciones
Columna cromatográfica: Es el sitio donde ocurre la separación analítica. Está fabricada de acero inoxidable (cromo, níquel) para tolerar altas presiones y ser químicamente inerte a la corrosión.
Soportes utilizados para la separación
- Papel
- Acetato de celulosa
- Gel de agarosa
- Gel de poliacrilamida (PAGE)
Aplicaciones principales
- Separación de proteínas
- Separación de ADN y ARN
- Diagnóstico clínico
- Investigación biomédica
- Biología molecular
- Genética