Fundamentos de Citopatología y Procesamiento de Muestras Citológicas en Anatomía Patológica

Introducción a la Citopatología y Citodiagnóstico

La citopatología es la parte de la anatomía patológica que estudia las alteraciones morfológicas de las células mediante diversos procedimientos.

El citodiagnóstico interpreta las lesiones presentes sobre células aisladas descamadas por medio de procedimientos clínicos. Su ventaja es realizar un muestreo de la lesión mucho más amplio y retirado; es simple, rápido, poco agresivo y de bajo coste, por lo que permite en poco tiempo identificar la mayor parte de las lesiones.

Proceso de Tinción y Preparación de la Hematoxilina

Para que la hematoxilina (Htx) pueda ser usada como colorante, debe ser oxidada a hemateina (cromógeno = benceno + grupos cromóforos). Este proceso puede ocurrir de forma espontánea al estar en contacto con el oxígeno atmosférico o ser incluido a través del empleo de oxidantes (óxido de mercurio, dicromato potásico).

La oxidación provoca la aparición sobre la molécula de un anillo que actúa como cromóforo y tiene la propiedad de teñir. La oxidación de la hematoxilina se llama maduración.

A la hematoxilina se le añade un mordiente, alumbre alumínico o potásico (grupos auxocromos), para convertirla en hemalumbre (colorante).

Azuleamiento y Diferenciación

• Azuleamiento: Es el empleo de diferentes soluciones alcalinas, como el agua y carbonato de litio, que es el que utiliza la Htx-Eosina para el azulamiento de los núcleos. Lavamos con agua para quitar la solución.
• Diferenciación: Se emplea porque, al ser la hematoxilina una solución básica, debemos quitar el exceso de esta con una solución ácida. Por eso utilizamos el alcohol ácido para quitar el exceso de colorante con carga negativa. Con la diferenciación echamos la solución y hasta el cambio de color no se vuelve a lavar con agua.

Tipos de Muestras Citológicas

Las células pueden obtenerse mediante los siguientes métodos:

• Por exfoliación forzada: Mediante el frotamiento o raspado con diversos instrumentos.
• A través de líquidos emitidos de forma espontánea: Que transxtan los elementos descamados (esputo, orina).
• A través de líquidos extraídos mediante instrumentos de exploración: En endoscopia con células en suspensión procedentes de zonas orgánicas internas. Estos líquidos pueden proceder de acúmulos originados espontáneamente en dichas zonas o ser el resultado de lavados de estos con suero fisiológico.
• Por punción-aspiración con aguja fina (PAAF): De lesiones en órganos sin acceso directo y que no tienen secreción espontánea (mama, tiroides, hígado).

Técnicas en Broncoscopia

La broncoscopia (endoscopia bronquial) se realiza para estudiar el interior de los bronquios. Los tipos de muestra son:

• Aspirado bronquial (BAS): Aspiración de células bronquiales. Después, en el laboratorio, se centrifuga el contenido del aspirado y el sedimento obtenido se extiende en el portaobjetos, a continuación se fija en alcohol de 96º.
• Lavado bronquial (BAL): Se introduce un fibrobroncoscopio y se inyecta a través de él una solución salina que lava de delante a atrás el segmento pulmonar, y luego se recoge el contenido por aspiración.
• Cepillado bronquial: Se introduce un cepillo a través del broncoscopio y se raspa la lesión. Se extrae y las células que quedan en las cerdas se extienden en el portaobjetos y se fijan con alcohol de 96º.

Procesamiento de Muestras Especiales en Citología

PAAF

Material sólido obtenido por PAAF procedente de órganos como mama y ganglio. Se fijan mediante secado al aire; el material quedará sin teñir 2-3 minutos para que se adhiera al portaobjetos. También puede fijarse con alcohol de 96º para su tinción con Papanicolaou.

Esputos

Encontramos dos técnicas de estudio:

• Pica y extiende: Se envía al laboratorio sin fijar. Una vez allí se estudia macroscópicamente y se estudian las áreas que presenten peculiaridades. Se toma muestra de estas zonas y se extiende en capa fina sobre el portaobjetos, fijándose en alcohol de 96º.
• Fijador de Saccomanno: Se mezcla el material de expectoración con este fijador (Carbowax 2% + alcohol 50%). La mezcla se realiza en un homogenizador y después se procesa como cualquier líquido.

Clasificación de los Frotis: Sistema Bethesda

Se cree que es el sistema más correcto. Se basa en:

• Correcta identificación de la muestra con el nombre y apellidos del paciente.
• Información clínica adecuada: debe constar al menos la edad y los datos clínicos que puedan aportar información.
• La muestra debe ser técnicamente correcta, con una extensión, fijación y tinción adecuadas.
• En citologías vaginales debe incluir células escamosas así como células de la zona de transformación.

Categorías de los Frotis

• Satisfactorio: Cumple todos los requisitos anteriores.
• Satisfactorio con limitaciones: Está limitado por falta de información clínica, presencia de sangre, componentes inflamatorios o contaminantes de forma que más del 50% de las células y menos del 75% no son valorables, o por ausencia de celularidad de la zona de transformación.
• No satisfactorio: No apto por falta de identificación, daños en la muestra o celularidad escasa.