Fundamentos y Aplicaciones de los Inmunoensayos Radiactivos: RIA e IRMA

Fundamentos de los Inmunoensayos Radiactivos

Se trata de una técnica de laboratorio in vitro en la que se hacen reaccionar muestras biológicas del paciente (sangre u orina) con antígenos (Ag) producidos en cultivos celulares o por otros animales. Esta reacción es altamente específica y capaz de detectar cantidades muy pequeñas (ng o incluso pg) de anticuerpos (Ac) sin necesidad de pretratar las muestras.

Es un tipo de inmunoensayo o método radioinmunométrico que se basa en la formación específica de los complejos Ag-Ac, lo que dota al proceso de una gran especificidad, unido a la alta sensibilidad de los métodos radiológicos.

RIA (Radioinmunoensayo)

RIA Convencional

El Ag está unido a un soporte sólido en una cantidad desconocida y se incuba con muestras que pueden contener o no el Ac específico para dicho Ag.

• Se lava el soporte sólido para eliminar los Ac que no hayan reaccionado.
• Se introducen los Ac marcados radiactivamente, los cuales tienen la misma afinidad por el Ag que los no marcados.
• Interpretación: A mayor cantidad de Ac y Ag marcados, menor concentración de Ac no marcados en la muestra inicial.

RIA Competitivo

El Ac está unido al soporte sólido en una cantidad desconocida. Se incuba con muestras que pueden contener o no el Ag específico, junto con Ag marcado radiactivamente.

• Se lava el soporte sólido para eliminar los Ag que no hayan reaccionado.
• Interpretación: A mayor cantidad de Ac y Ag marcados, menor concentración de Ag no marcados en la muestra inicial.

IRMA (Inmunorradiométrico)

IRMA Competitivo

El Ag está unido al soporte sólido en cantidad desconocida. La muestra a determinar se añade junto con Ag y Ac marcado radiactivamente. Se incuba y se lava para que solo quede el complejo Ag-Ac unido al soporte sólido.

• Interpretación: A mayor concentración de Ag, menor cantidad de Ag-Ac marcado queda en el soporte.

IRMA No Competitivo (Tipo Sándwich)

Se utilizan dos tipos de Ac: uno unido al soporte y el otro marcado radiactivamente.

• Se añade la muestra con el Ag a determinar.
• Se incuba y se añade el segundo Ac marcado en exceso, el cual se une al Ag que ya está unido al primer Ac.
• Se lava, quedando solo en el soporte el complejo Ac-Ag-Ac marcado.
• Interpretación: A mayor concentración radiactiva en el soporte, mayor cantidad de Ag había en la muestra inicial.