Fijadores Histológicos: Propiedades, Usos y Aplicaciones en Preparación de Tejidos

La fijación es un paso crucial en la preparación de muestras biológicas para su estudio microscópico. Este proceso busca preservar la estructura celular y tisular de la manera más fiel posible a su estado in vivo, evitando la autolisis y la putrefacción. A continuación, se detallan los fijadores más comunes, sus características y aplicaciones específicas.

Fijadores Simples

Etanol

• Precipita glucógeno, conserva muestras y preserva enzimas.
• Causa deshidratación.
• Fijación rápida, mal mordiente, bactericida.

Ácido Acético

• Precipita proteínas, fija ácidos nucleicos y nucleoproteínas.
• Provoca cambio en el estado coloidal.
• Se usa ácido acético glacial (puro), diluido en concentraciones del 1-5%.

Acetona

• Utilizada en métodos histoquímicos e inmunohistoquímicos.
• Preserva la estructura antigénica y enzimática.
• Causa deshidratación.
• Fija rápidamente y endurece los tejidos.
• Se emplea a 4°C sin diluir.

Ácido Pícrico

• Fijador estructural.
• No disuelve glucógeno ni lípidos.
• Forma sales (picratos).
• Es explosivo y tiñe los tejidos de amarillo.

Formaldehído

• Fijador universal en histología.
• Preserva tejido nervioso y lípidos.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Compatible con la mayoría de las tinciones.
• La velocidad de fijación varía según la temperatura.
• Es barato y tóxico.

Glutaraldehído

• Usado en microscopía electrónica (ME) y para piezas cerebrales.
• Actúa como conservante.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Se usa en mezclas con tetraóxido de osmio.
• Requiere concentraciones bajas.
• Presenta menor velocidad de fijación.
• Puede hinchar los tejidos.
• Adecuado para perfusión.

Tetraóxido de Osmio

• Fija ácidos grasos (ME).
• Utilizado para mielina, tinciones argénticas y el método de Golgi.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Es caro, se descompone con la luz, volátil y tóxico.

Glioxal

• Alternativa al formol.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Es caro y biodegradable.
• No emite vapores.

Cloruro de Mercurio

• Utilizado en estudios hematopoyéticos y renales.
• Forma sales con los tejidos.
• Es muy tóxico.
• Actúa como buen mordiente.

Dicromato de Potasio

• Preserva lípidos complejos, mielina, mitocondrias y aparato de Golgi.
• Forma sales con los tejidos.
• Presenta baja velocidad de penetración y no endurece.
• Posee un buen efecto mordiente.

Ácido Tricloroacético

• Fija nervios.
• Provoca cambios en el estado coloidal.
• Nunca lavar el tejido después de la fijación.

Ácido Crómico

• Uso para microscopía electrónica (ME).
• Provoca cambios en el estado coloidal.
• En tinciones con colorantes básicos, actúa como buen mordiente y tiñe los tejidos de verde.
• Lavar abundantemente después.

Fijadores Compuestos y Mezclas

Formalina Tamponada (Mezcla de Formaldehído)

• Previene el choque osmótico y el depósito de pigmentos de formol.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Posee las características del formaldehído.
• Fórmula: 10 ml de formalina pura, 4 g de fosfato sódico monobásico, 6.5 g de fosfato sódico dibásico y 900 ml de H₂O.

Líquido de Bouin

• Alternativa al formol para tejidos delicados como piel, testículos, embriones y órganos endocrinos.
• Preserva el núcleo y el glucógeno.
• Tiene un pH muy ácido.
• Composición: Formaldehído + Ácido Acético Glacial + Ácido Pícrico.

Líquido de Carnoy

• Considerado el mejor para glucógeno e hidratos de carbono, y proteínas fibrilares.
• Favorece la coloración de ácidos nucleicos.
• Composición: Etanol + Ácido Acético Glacial + Cloroformo.

Fijador de Müller

• Se utiliza para preparar otros fijadores como el de Orth y el de Zenker.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Tras la fijación, lavar con agua corriente.

Fijador de Orth

• Utilizado para impregnación argéntica en tejido nervioso.
• Provoca reticulación de las proteínas.
• Se usa con solución madre o líquido de Müller.

Líquido de Helly

• Utilizado para tinción nuclear en el sistema linfático y hematopoyético.
• Forma sales con los tejidos.

Solución de B5

• Fijador de elección para riñón, hígado, fibras de tejido conectivo y fibrina.

Glutaraldehído-Osmio

• Uso para microscopía electrónica (ME).

Solución de Baker (Formol Cálcico)

• Utilizada en técnicas de histoenzimología.