Conceptos Clave en la Extracción y Purificación de Ácidos Nucleicos (AANN)

Repaso de Conceptos Fundamentales en la Obtención y Purificación de Ácidos Nucleicos

1. Aislamiento de Ácidos Nucleicos (AANN)

1. ¿Mediante qué se aíslan del exterior los AANN?

Membrana celular o pared celular.

2. Sistemas de Obtención de Muestras de Mucosa Oral

• Mediante raspado con torunda o cepillo.
• Mediante enjuague.
• Recolectando saliva.

3. Purificación por Esferas Magnéticas

3. ¿En qué se basa la purificación por esferas magnéticas?

Se basa en la unión de los AANN a microesferas magnéticas que pueden ser retenidas mediante un imán.

4. Enzimas para Lisis Celular

4. Enzimas utilizadas para romper células vegetales, levaduras y hongos:

• a) Lisozima.
• b) Liticasa.
• c) Lisostafina.
• d) A y B

5. Pretratamiento de Tejidos Animales Frescos

5. La obtención de AANN de tejidos animales frescos tiene un pretratamiento de:

• a) Homogeneización.
• b) Resuspensión.
• c) Recolección.
• d) Centrifugación

6. Principio de la Ultrafiltración

6. La ultrafiltración se basa en:

• a) Retención por tamaño de AANN por membranas con tamaño de poro determinado.
• b) Retención por peso de AANN por membranas con tamaño de poro determinado.
• c) Retención por tamaño de AANN por membranas con tamaño de poro irrelevante

7. Terminología Química

7. ¿Qué significa CTAB?

Cetil-trimetil-amonio.

8. Función del NaOH en la Lisis de Plásmidos

8. Función del NaOH en el tampón de lisis en la purificación de plásmidos:

Para desnaturalizar el ADN bacteriano y plasmídico.

9. Interpretación de Electroforesis de ARN Total

9. V o F: En la electroforesis de una muestra de ADN total degradado de un organismo eucariota se observan 2 bandas nítidas correspondientes a los ARN mensajero 28s y 18s junto con un ligero SMEAR por el ARN ribosómico.

Falso: No es ARN ribosómico, es ARN mensajero (las bandas 28S y 18S corresponden al ARN ribosómico, no al mensajero).

10. Definición de Cultivos Celulares

10. ¿Qué son los cultivos celulares?

Son métodos de obtención de células in vitro mediante siembras controladas en medios adecuados.

11. Nomenclatura de Precipitación Salina

11. ¿Cómo se denomina también la precipitación por sales?

Salting out.

12. Procedimientos de Obtención de AANN

12. Indica el error: La obtención de AANN purificados a partir de una muestra biológica se lleva a cabo por varios procedimientos técnicos discontinuos.

Error: Solo un procedimiento, continuo (Implica que el proceso completo es una secuencia continua de pasos, aunque cada paso técnico pueda ser discontinuo).

13. Pretratamiento de Cultivo en Monocapa

13. ¿Qué pretratamiento tiene el cultivo de células en monocapa?

Utilizar el frasco para continuar el proceso de extracción o pasar la monocapa a un tubo.

14. Eliminación de Proteasas

14. A la solución de lisis se le pueden eliminar proteasas como proteinasa K:

Verdadero.

15. Función del EDTA

15. ¿Qué es el EDTA?

• a) Quelante que inhibe ARNasas.
• b) Digiere proteínas.
• c) Desestructura las membranas.

16. Lisis Alcalina

16. La lisis alcalina es el método más utilizado en la purificación de plásmidos:

Verdadero.

17. Pretratamiento del Esputo

17. ¿En qué consiste el pretratamiento del esputo?

Consiste en una fluidificación con un agente mucolítico del tipo de la NALC. También se puede añadir NaOH para descontaminar la muestra si se quiere detectar una micobacteria.

18. Verificación de Uso de Enzimas

18. V o F:

• a) Lisosteína para degradar pared Gram +: Falso.
• b) Liticasa para células vegetales, levaduras y hongos: Verdadero.

8. Repetición de Pregunta (Nota: Se mantiene la estructura original)

8. (Repetición de la pregunta 8 original)

Función del NaOH en el tampón de lisis en la purificación de plásmidos: Para desnaturalizar el ADN bacteriano y plasmídico.