Clona

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ingniería gnética o dnar.
*s basa en técnicas d biología molcular
*s usa xa cambiar la composición gnética d la célula, kitándo y agrgando cosas, (con so s sta moviendo gns)
*s puedn aislar gns, modificarls, introducirls a nuevos ospdros, y clonarls
bactrias o procarionts
axivixacolin, la q + s usa xa clonar gns
vntajas:*crcn rapido ; *facil d manipular
dsvntajas:: *nolimina introns (sn ncsarios xa alg1s gns, xa prmitir lalongación postrior d ls protínas)
*el tamaño dl dna k pued sr colocado en 1a bactria s limitado (su gnoma s rducido, si s sobrpasa lo dgrada)
*procariotas no glicosilan protínas (s imprtant xa 2 funcions: tnr la conformación 3d d la protína y xa tnr su función biológica.
*xa podr producir protínas eucariotas glicosiladas s dbn utilizar otros sist+ cm sn lvaduras o
células d insrto principalmnt
nuclasas
enzi+ q s obtuvieron gracias a ls bactrias,
con stas s pudo manipular, cortar, movr gns entr distintas spcis.
existn 2 tipos d nuclasas:
Øexonuclasas 3 pri+, k sn ls k comn dsd 3´.
Øexonuclasa 5` pri+: q sn copia d trisfosfato
Øendonuclasas: cortan al intrior dl dna, cuyo sustrato db sr dna d dobl ebra, fueron dscubiertas en bactrias.
enzi d rstricción o endonuclasas spcif: xa studios molculars
*naturals d bactrias (no existn en células eucariotas)
*mcanismos d dfnsa contra infccions virals, cortanl adn viral,
* scuencia d rconocimiento: usualmnt 4 o 6 bass
* scuencia palindro (s lo misma cuando 1a cadna s lída d izkierda a drxa o vicvrsa)
*djan extrmos co sivos y romos
*rompn 1 enlac fosfodistr en c/ ebra
* rconoc la scuencia sa dl individuo k sa.
*ejmplo: ecor1
2 tipos d corts:
*extrmos co sivos, protusivos o pgajosos (la ecor1), sirvn + xa clonar
*extrmos romos (la pa1)
plasmi2:
*eyemnto o vctor d adn circular propio d ls bactrias
*sirv xa yevar información d 1a clular a otra
*tien gn d rsistncia a antibióticos (normalmnt s usa la ampicilina).
*orign d rplicación propioori (s puedn ralizar copias d si mismo)
*tienn sitio d rstricción imxtant.
*tien en promdio dsd 4 a 6 mil pb
*no forma part dl dl gnoma,
*1ero: pbr322.
* ay probabilidad d q s alinie consigo mismo o con 1 gn disprso (mutación)
*la adn ligasa lo 1e conl gn q s kier clonar, sya y s obtin la molécula rcombinant
clonación: obtnción d organismos gnéticamnt idénticos.
2 tipos:
Øclonación molcular: aislar o multiplicar 1 gn (o cualkier trozo d dna). dsdl pto d vista d la biología molcular o ing.gnética.
Øclonación clular: en organismos supriors. consist en obtnr 1 individuo a partir d 1a célula o d 1 núclo (k vnga d otro individuo).



*cuandol plasmido ingrsa dntro d la bactria (bactria modificada gnéticamnt):
* s incuba 30 min. ielo (así s cm la mutación dl plasmido s dposita sobr la pard d la bactria)
* 42ºc la bactria formara xos, al entraral plásmido, stos s crraran (qdando 1 bactria transf.)
* la bactria incorxa al plasmido x xok trmico.
*las q tomn rsistncia antibióticos tndránl plásmido
*cm en pcr la polim agrga 1a a. s cra 1
plasmido con 1a t (q protuya, co siva),
*no ay k cortar con enzi+ d rstricción
*el producto s ligo dircta% conl plasmido, (vasta 1a sola bas k protruyal dna y sirv xa ligar),
*scuenciar y trabajar con 1
gnoma (ants stábamos trabajando con gns) s ac 1 poco + complicado,l procso s casil mismo, ay k fragmntar clonar scuenciar,
gnomica structural: conocr y analizar la scuencia nuclotídica dl gnoma d 1 organismo, y
obtniendo la scuencia d 1 gnoma
1.aislarl dna intacto (k no st fragmntado)
2.fragmntarl dna (x ej con enzi+ d rstricción)
3.colocar ls fragmntos en 1 vctor (ya no s 1 plásmido, sino klmntos + facils xa trabajar con grands gno+, cm sn ls cromoso+ artificials d lvadura).
4.clonarl dna (xa obtnr 1a gran cant).
5.scuenciarl dna (xa obtnr 1a buena cantidad d fragmntos con distintas scuencias)
gnotca srie d clons k contiennl gnoma d 1 organismo, normalmnt bactrias
transgénico
organismo modificado gnéticamnt
contien 1a fracción dl adn d otro organismo intgrado en su propio adn
s insrta normalmnt 1 gn,
lo k s introducir * lo gnral, s 1 gn k va a producir 1a protína (va a dar 1a nueva función o rasgo a s organismo.
*xa sabr cual plásmido tiennl gn d intrés, ago pcr al dna plasmidal
bnficios transgnicos
Øincrmnto en la productividad.
Øincrmnto en la calidad.
Ørsistncia a plagas.
Øincrmnto en la inocuidad.
Ø rsistncia a enfrmdads y strés ambiental.
Ømjora dl sabor y propiedads nutricionals.
Øsólo s transfierl gn d intrés, x lo kl gnotipo rsultant s + control
clonar 1 org transgnico:
** uevo frtilizado: microinyector, gn d intrés enl pronuclo +culino. procso s al azar.l embrión s inyecta en 1a madr suplnts spramos k nazcan ls bbs.
xa dtrminar cual dyos s transgénico (kiero vr si tienl gn), ls saco sangr y ago pcr.
**transfrncia d núcls, (doyy) ,
s tomo 1a célula d 1a mama d 1a ovja,
s l sacol ovocito djandol núclo d 1 individuo
s anuclo 1 ovocito d otro individuo.
a st núclo s insrto enl ovocito
luego s va a 1a madr sustituta, (s dja kl ovocito s divida normalmnt)
finalmnt tnmos 1 clon.
clonación d animals (transfrncia dl núcls d 1a clula somatica: clula difrnciada)
biotcnologÍa manipulación d ls for+ d vida, xa provr 1 poducto dsabl xal uso dl ombr.
*prmit sinttizar protínas (crar nuevas plantas, animals, alimntos, antibióticos).

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