Tipus de Cromatografia: Classificació i Paràmetres

Classificació segons l'estat físic de les fases

• De líquids: La fase mòbil és líquida i la fase estacionària és sòlida o líquida immiscible.
• De gasos: La fase mòbil és un gas inert i la fase estacionària és un sòlid o un líquid retingut per un suport sòlid inert.
• De fluids supercrítics: La fase mòbil és un fluid supercrític i la fase estacionària pot ser sòlida o líquida.

Segons la disposició de la fase estacionària

• En columna: La fase estacionària està continguda en un tub a través del qual es fa passar la fase mòbil. Aquesta es desplaça per capil·laritat, gravetat o pressió.
• Plana: La fase estacionària es col·loca en un suport pla. La fase mòbil és líquida i el seu flux s’aconsegueix per capil·laritat o per capil·laritat i gravetat. Pot ser: Cromatografia en paper i Cromatografia en capa fina.

Mecanismes de separació

• Cromatografia d’adsorció: S’utilitza una fase estacionària sòlida i una fase mòbil líquida o gasosa.
• De repartiment: La fase estacionària és un líquid retingut sobre un suport sòlid.
• D’intercanvi iònic: S’uneixen anions o cations covalentment a una fase estacionària sòlida, de manera que adquireix una càrrega neta.
• D’afinitat: S’utilitzen interaccions altament específiques entre un tipus de molècules de la mostra i altres molècules que s’uneixen (immobilitzen) covalentment a la fase estacionària.
• D’exclusió molecular (o filtració en gel): A diferència del que succeeix en altres cromatografies, en aquesta no existeixen interaccions entre la fase estacionària i els components de la mostra; la fase estacionària actua com un simple tamís.

Cromatograma i paràmetres

El cromatograma és un gràfic que representa la resposta del detector en funció del temps d’elució o del volum eluït.

Paràmetres característics

• L’eficiència: Depèn de les característiques de la columna (mida de les partícules, homogeneïtat), així com de la velocitat, la viscositat de la fase mòbil i la temperatura de treball.
• Resolució: Expressa el grau de separació per a dos components determinats.

Electroforesi

Es coneix com a electroforesi la tècnica mitjançant la qual se separen les biomolècules en dissolució quan es veuen sotmeses a un camp elèctric.

Reaccions d'intercanvi iònic

• Resines aniòniques: Baixen el pH.
• Resines catiòniques: Pugen el pH.