Técnicas Analíticas en Bioquímica Clínica
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BILIRRUBINA DIRECTA:
La
bilirrubina directa presente en la muestra reacciona con el ácido sulfanílico
Diazoado, originando un complejo coloreado que puede determinarse por
Espectrofotometría. -Espectrofotométrica, VIS, colorimétrica, a punto final y
Directa
BILIRRUBINA TOTAL:
La
Cretimida solubiliza la bilirrubina indirecta, permitiendo su reacción junto
Con la fracción directa, que reacciona con el ácido sulfanílico diazoado,
Originando un complejo coloreado que puede determinarse por espectrofotometría.
-Espectrofotométrica, VIS, colorimétrica, a punto final y directa
FRUCTOSAMINA:
Las
Proteínas glicadas séricas reducen a las sales de tetrazolio (NBT) en medio
Alcalino. La velocidad de formación del formazán a una temperatura determinada
Es proporcional a la concentración sérica de proteínas glicadas. -Espectrofotométrica,
Colorimétrica, VIS, cinética, a dos puntas y directa.
FÓSFORO:
El
Fosfato inorgánico presente en la muestra reacciona con el molibdato en medio
ácido, originando un complejo que se cuantifica por espectrofotometría -Espectrofotométrica,
UV, a punto final y directa.
MICROALBUMINURIA:
La
Albúmina presente en la muestra de orina provoca la aglutinación de las
Partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-albúmina humana. La
Aglutinación de las partículas de látex es proporcional a la concentración de
Albúmina y puede ser cuantificada por turbidimetría. -Espectofotometrica,
Colorimetrica, VIS, cinética, a dos puntos y directa.
AST/GOT:
La
Aspartato aminotransferasa (AST o GOT) cataliza la transferencia del grupo
Amino del aspartato al 2-oxoglutarato, formando oxalacetato y glutamato. La
Concentración catalítica se determina, empleando la reacción acoplada de la
Malato deshidrogenasa (MDH), a partir de la velocidad de desaparición del NADH,
Medido a 340nm. -Espectrofotométrica, UV, enzimática, cinética e indirecta
ALT/GPT:
La
Alanina aminotransferasa (ALT o GPT) cataliza la transferencia del grupo amino
De la alanina al 2-oxoglutarato, formando piruvato y glutamato. La
Concentración catalítica se determina, empleando la reacción acoplada de la
Lactato deshidrogenasa (LDH), a partir de la velocidad de desaparición del
NADH, medido a 340Nm -Espectrofotométrica, UV, enzimática, cinética e indirecta
GGT:
La
Gamma-glutamiltransferasa (γ-GT) cataliza la transferencia del grupo
γ-glutamilo de la γ- glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida a la glicilglicina,
Liberando 3-carboxi-4-nitroanilina. La concentración catalítica se determina a
Partir de la velocidad de formación de la 3-carboxi-4- nitroanilina. -Espectrofotométrica,
VIS, enzimática, cinética, colorimétrica y directa.
FOSFATASA ALCALINA:
La
Fosfatasa alcalina (FAL) cataliza en medio alcalino la transferencia del grupo
Fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP), liberando
4-nitrofenol. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad
De formación del 4-nitrofenol, medido a 405nm. -Espectrofotométrica, VIS,
Enzimática, cinética, colorimétrica y directa.
FOSFATASA ACIDA:
La
Fosfatasa ácida (FAC) cataliza en medio ácido la hidrólisis del α-naftil
Fosfato. El α-naftol producido reacciona con una sal de diazonio (Fast Red TR)
Formando un cromógeno. La actividad catalítica se determina a partir de la
Velocidad de formación de dicho cromógeno medido a 405 nm1. El pentanodiol
Acelera la reacción al actuar como aceptor del fosfato. El tartrato se utiliza
Como inhibidor específico de la denominada fracción prostática. - Espectrofotométrica,
VIS, enzimática, cinética, colorimétrica e indirecta
LDH:
La lactato
Deshidrogenasa (LD o LDH) cataliza la reducción del piruvato por NADH,
Obteniéndose lactato y NAD+. La concentración catalítica se determina a partir
De la velocidad de desaparición del NADH, medido a 340nm -Espectrofotométrica,
UV, enzimática, cinética y directa
CK TOTAL:
La
Creatina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de
Creatina, obteniéndose creatina y ATP. La concentración catalítica se
Determina, empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, a partir de la velocidad de formación del
NADPH, medido a 340nm + Glucosa - 6 -
Fosfato + NADP+ Gluconato - 6 - fosfato + NADPH + H+ -Espectrofotométrica, UV, enzimática,
Cinética, e indirecta
CK-MB:
Un
Anticuerpo específico inhibe las dos subunidades M de la CK-MM (CK-3) y la
única subunidad M de la CK-MB (CK-2), lo que permite la medición de la
Subunidad B de la de la CKMB (asumiendo la ausencia de CK-BB o CK-1)1,2. La
Concentración catalítica de CK-B, que corresponde a la mitad de la actividad
CK-MB, se determina empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa (HK) y
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6P-DH), a partir de la velocidad de
Formación del NADPH, medido a 340nm
-
Espectrofotométrica de inmunohinibición, UV, enzimática, cinética, e indirecta
Α- AMILASA PANCREÁTICA:
La α-amilasa cataliza la hidrólisis del
4-nitrofenil-maltoheptaósido-etilideno a oligosacáridos, que son sustratos para
La α-glucosidasa, capaz de liberar 4-nitrofenol. La concentración catalítica se
Determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol, medido a
405nm. Mediante anticuerpos específicos se inhibe la isoenzima salival de la
α-amilasa lo que permite la medición de la isoenzima pancreática.
-
Espectrofotométrica de Inmunohinibición, VIS, enzimática, cinética, colorimétrica e indirecta
SANGRE OCULTA EN HECES:
Una almohadilla impregnada de hemoglobina con conjugado de oro con
Anticuerpos coloidales se ubica al final de la membrana. Si hay presencia de
Hemoglobina humana en la muestra fecal del paciente disuelto en solución
Salina, la mezcla se mueve a lo largo de la membrana cromatológicamente por
Acción capilar. Esta mezcla se desplaza luego al área de lectura (T), dando lugar a
Una línea visible de Ac complejos al co0ntar con la hemoglobina humana. En caso
De ausencia en la muestra de hemoglobina humana, no aparecerá ninguna línea en
El área de lectura (T). Por lo tanto la presencia de una línea de color en el
área de la lectura (T) conlleva un resultado positivo. Siempre aparecerá una
Línea en el área de control ©, que sirve como indicador de buen funcionamiento.
-
Inmunocromatográfica De flujo lateral cualitativo
THC:
Los
Metabolitos de THC (tetrahidroxicarabinol) compite contra el conjugado de
Metabolito de THC por los lugares de reacción de su Ac específico. Si el
Metabolito de THC está presente en la muestra de orina, por debajo de la
Concentración limite, no se saturarán los puntos de reacción del Ac que reaccionarán
Con el conjugado de THC y se formará la línea en la regíón del test (T). -Inmunocromatografica
De flujo lateral cualitativo.