Microbiología Clínica: Estructura, Taxonomía, Tinciones y Medios de Cultivo

Biología6 nov 20267,46 KB

Introducción histórica y bioseguridad

Antón (1677, espermatozoide), Robert (hongos filamentosos, 1660, célula), Filippo (cólera), Louis (estafilococo y estreptococo), Koch (bacilo de la tuberculosis, 1882), Edward (vacuna de la viruela, 1796).

1. Antisepsia y asepsia

Aparición de la biología molecular (BM).

Clasificación de los microorganismos

Bacterias, virus, hongos, parásitos y priones.

Funciones

Aislamiento, identificación y recuento, denominación y determinación de sensibilidad.

Clasificación por grupo de riesgo

Grupos 1, 2, 3 y 4.

Epidemiología

Esporádicas
Endémicas
Epidémicas
Pandémicas

Niveles de seguridad biológica

Nivel 1: cepas definidas de microorganismos viables.
Nivel 2: amplio espectro de agentes de riesgo moderado.
Nivel 3: transmisión respiratoria, infección grave o letal.
Nivel 4: agentes que pueden transmitirse a través de aerosoles; zona aislada.

Principales accidentes

Accidentes (4).

Estrategias generales de prevención

Barreras: físicas, químicas y precauciones universales.

Primarias: EPI y cabinas de seguridad.

Secundarias: instalaciones, señalización y medidas de contención (3).

Normas generales

Vías de transmisión

Vía aérea; parenteral, cutánea o mucosas; oral.

Gestión de residuos

Clase I: residuos generales.
Clase II: residuos biosanitarios asimilables a urbanos.
Clase III: residuos biosanitarios especiales: (1) altamente virulentos, (2) oral-fecal, (3) aerosoles, (4) filtros de diálisis, (5) residuos punzantes, (6) cultivos, (7) residuos de animales, (8) líquidos corporales, (9) residuos anatómicos humanos.
Clase IV: residuos (4).
Clase V: residuos químicos.
Clase VI: residuos tóxicos.
Clase VII: residuos radiactivos.

2. Estudio de microorganismos y cultivo

Cultivo de microorganismos (cultivo puro y caracterización).

Estructura bacteriana

Unicelular procariota: componentes comunes y específicos.

Pared celular

Gram positivas: ácidos teicoicos.
Gram negativas: LPS.
Bacterias sin pared celular.

Membrana citoplasmática

Funciones.

Genoma bacteriano

Funciones. Plásmidos: conjugativos, de resistencia y de virulencia.

Ribosomas

Otros componentes

Cápsula: funciones.
Flagelos: atricos, monotricos, lofotricos, anfitricos, peritricos (estructura).
Fimbrias y pili
Endosporas

Taxonomía

Criterios clásicos: morfológicos (5), genéticos (2), metabólicos (4), ecológicos (3).

Criterios moleculares: genotípicos (2), fenotípicos (3).

Organización taxonómica: dominio, filo, clase, orden, familia, género, especie.

Estudio morfológico

Morfología microscópica individual

Cocos, bacilos, cocobacilos, vibrios, espirilos y espiroquetas.

Agrupaciones de cocos

Diplococos: Neisseria
Tétradas: Micrococcus
Cadenas: Streptococcus
Sarcinas: Sarcina
Racimos: Staphylococcus

Agrupaciones de bacilos

Cadenas: Bacillus
Empalizada: Listeria
Letras chinas
Ramificados: Nocardia

Morfología macroscópica

Técnicas de tinción y observación

Microorganismos vivos

Preparaciones húmedas, método de gota pendiente y coloraciones vitales.

Microorganismos muertos

Extensión, fijación, tinción, lavado y secado para microscopía.

Tinciones cromogénicas

Ácidas/aniónicas
Básicas/catiónicas
Neutras/anfóteras
Indiferentes

Tinciones simples

Azul de metileno, nigrosina, azul de lactofenol y yodo.

Tinciones diferenciales

Gram: cristal violeta, Lugol, decoloración y contratinción con safranina.

Ziehl-Neelsen: tinción en caliente con fucsina, decoloración ácido-alcohol y contraste con azul de metileno.

Tinciones estructurales

Cápsula: tinta china, Hiss, nigrosina.
Flagelos: Leifson, Rhodes.
Endosporas: Wirtz-Conklin.

Tinciones fluorescentes

Directa: naranja de acridina, auramina-rodamina.

Indirecta

3. Metabolismo y medios de cultivo

Metabolismo nutricional

Energía: quimiotrofo, fototrofo.
Poder reductor: litótrofo, organotrofo.
Carbono: autótrofo, heterótrofo.

Metabolismo productor de energía: respiración o fermentación.

Composición de los medios

Aportan: carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales minerales.

Se añaden: carbohidratos, peptonas, extracto de carne, extracto de levadura, sangre y sangre lactada.

Otros componentes: factores de crecimiento, inhibidores e indicadores.

Agentes gelificantes: agar y gelatina.

Clasificación de los medios

Por estado físico: sólido, semisólido y líquido.
Por composición: químicamente definidos, complejos o indefinidos.
Por función: generales, enriquecidos, selectivos, diferenciales, de transporte y de conservación.

Preparación: a partir de medio deshidratado (7) y enfriamiento de tubos.

Medios nutritivos generales

Agar nutritivo.

Medios enriquecidos

Agar sangre: infusión de corazón/peptona, cloruro de sodio, hemólisis.
Agar chocolate
Mueller-Hinton: determinación de sensibilidad a antibióticos.

Medios selectivos

Thayer-Martin
Löwenstein-Jensen: aislamiento de micobacterias, verde malaquita y huevo.

Medios diferenciales

Agar KIA: enterobacterias.
CLED: crecimiento de microorganismos en muestras de orina; lactosa y L-cistina.
DNasa

Medios diferenciales y selectivos

Bilis-esculina: aislamiento y diferenciación de enterococos intestinales.
MacConkey: bacterias entéricas.
Hektoen entérico: aislamiento y diferenciación de bacterias entéricas Gram negativas; azul de bromotimol, fucsina y citrato de hierro.
Levine: peptona, lactosa, eosina y azul de metileno.