Medis de cultiu: tipus, components i factors de creixement

Definició i Components

Un medi de cultiu és un conjunt de substàncies nutritives preparades al laboratori per a desenvolupar i multiplicar els microorganismes.

Medis definits: Els ingredients presenten una composició química perfectament establerta.

Altres substàncies:

• Fluids corporals: Plasma, sèrum sanguini, sang completa. S'afegeixen als medis utilitzats en el cultiu de patògens.
• Agents reductors: S'afegeixen per al cultiu d'anaerobis estrictes, ja que redueixen l'oxigen. Exemples: cisteïna, tioglicat.
• Sistemes amortidors: Són components que s'incorporen al medi de cultiu per a mantenir el pH dintre del rang òptim del creixement bacterià. Ex: Fosfats bisòdics o bipotàssics.
• Indicadors de pH: S'afegeixen als medis de cultiu amb l'objectiu de detectar variacions de pH. Ex: bacteris que fermenten la lactosa i fan virar l'indicador vermell neutre a vermell.

Tipus de Medis Segons la Consistència

• Medis líquids o brous: Contenen només els nutrients dissolts en aigua.
• Medis sòlids: Contenen nutrients dissolts en aigua a més d'un agent solidificant que dona rigidesa al medi. Els microorganismes són inoculats en la superfície d'aquests medis sòlids on creixen les colònies.
• Medis semisòlids o fluids: Contenen menor quantitat d'un agent solidificant donant lloc a una consistència gelatinosa. Utilitzats en estudis de mobilitat.

Tipus de Medis Segons la Funció

• Medi d'enriquiment: És un medi líquid que presenta una composició química que afavoreix el desenvolupament d'un tipus de microorganismes. Ex: Brou lactosat.
• Medis selectius: Formats per compostos que inhibeixen el creixement de determinats grups de microorganismes i toleren el desenvolupament d'altres. Ex: Brou selenit.

Factors que Afecten el Creixement

Temperatura

• Termòfils: 50/60 graus.
• Mesòfils: 20/40 graus.
• Psicròfils: 10/20 graus.

Oxigen

• Aerobis estrictes: No poden viure sense oxigen.
• Anaerobis estrictes: No poden viure en presència d'oxigen.
• Anaerobis facultatius: Presència/absència, si en tenen l'utilitzen.
• Anaerobis aerotolerants: Absència/presència però fan fermentació.

pH

• Acidòfils: Medi àcid (pH 6,5).
• Neutròfils: pH 7,5.
• Alcalòfils: pH 9,5.

Conservació i Manteniment

• Medi deshidratat: 2 anys.
• Plaques preparades: 3 mesos.
• Suplements: 30 mesos.
• Plaques filtració: 6 mesos.

Incubació

Depèn del metabolisme del microorganisme a cultivar:

• L'atmosfera aplicada (aerobi, microaeròfil, anaerobi).
• Temps.
• Temperatura.

Fabricants de Medis

Han de proporcionar informació sobre les especificacions de qualitat, com a mínim:

• Nom del medi i llista de components, inclòs qualsevol suplement.
• Data de venciment del medi.
• Condicions d'emmagatzematge.
• Control d'esterilitat.
• Control del creixement dels microorganismes d'interès (target) i dels microorganismes no desitjats (no target) i criteris d'acceptabilitat.
• Controls físics i criteris d'acceptabilitat aplicats.
• Data d'emissió de les especificacions.

Definició de Productivitat

La productivitat (PR) es defineix com:

PR = Ns/No

On:

• Ns és el recompte total de colònies obtingudes en el medi de cultiu a provar (obtingut d'una o més plaques).
• No és el recompte total de colònies obtingudes en el medi de cultiu de referència, obtingudes d'una o més plaques que ha de ser > 100 ufc.

En general, perquè els medis no selectius com el PCA siguin conformes, el PR ha de ser > 0,7.