Librerías Genéticas y Genómica

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LIBRERÍAS GÉNICAS

Librería genómica: consiste en el DNA cromosómico completo de un organismo, el cual ha sido introducido en vectores (clones). Permite estudio de la secuencia de los genes.

Librería de cDNA: consiste en la representación del mRNA incluida en vectores, de una célula o tejido en un preciso momento. Permite el estudio de la secuencia de los transcritos o RNA (expresión de los genes).

Genómica. Mapas genéticos y físicos del genoma

Genómica

Conjunto de estrategias y tecnologías empleadas para la caracterización molecular del genoma.

Genómica estructural

Estudio de las técnicas y estrategias necesarias para obtener tanto los mapas físicos (a distinta resolución) y genéticos. Se incluye el proyecto genoma humano.

Genómica funcional

Corresponde a la caracterización del proteoma, es decir el conjunto de todas las proteínas originadas por el genoma. En definitiva corresponde al estudio funcional del DNA codificante.

Mapa genético o de ligamiento: Proporciona la menor resolución. Sitúa de forma aproximada en los cromosomas diversos loci (de genes y de otros marcadores o secuencias identificables. El cálculo de la distancia y, por tanto, la ubicación relativa de genes o marcadores, se basa en la frecuencia con la que los pares de loci se transmiten conjuntamente a la descendencia.

Mapa físico: Asigna localizaciones a los marcadores, definidas por distancias en pares de bases. Destacan entre sus variantes los mapas de restricción (ordenación en el cromosoma de los sitios de restricción para distintas enzimas)

Secuenciación: Equivale a la obtención del mapa genómico en su nivel más detallado. Su objetivo es establecer la secuencia nucleotídica completa del genoma humano. Se lleva a cabo en paralelo y con el apoyo de la información proporcionada por los mapeos genético y físico.

PCR cuantitativo – PCR en tiempo real (qRT-PCR)

Derivación del PCR

Ocupando un sistema altamente sensible que permite la cuantificación del amplificado. Esto permite determinar la cantidad de absoluta o relativa del templado inicial.

Sistemas de detección

Por SYBR-green y sondas internas asociadas a fluoróforos. La fluorescencia es detectada por un Light Cycler.

Permite cuantificar DNA genómico (ej: viral) y cDNA (expresión génica).

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