Kerlinger método científico

Validación

Debe demostrarse que el método cumpla con ciertos criterios o carácterísticas de funcionalidad, cuado se demuestra se dice que el método es validado

Metodología analítica:

Técnica

- es un principio científico que puede ser útil para suministrar información sobre la compoción de una muestra

. Método

- es la adapatacion de una técnica para un propósito especifico.

Procedimiento

- un procedimiento consiste en la información escrita necesaria para la correcta utilización de un método.

Protocolo.-

es una serie de direcciones precisas y definidas que deben seguirse si se quiere que los resultados analíticos se acepten para un propósito especifico dado resultado valido o no valido

Etapas para el desarrollo de un método analítico:

investigación bibliográfica, definir las condiciones de trabajo, desarrollar el método, estandarizar el método, validar/verificar/tranferir

Validar

- es verificar documentalmente que un método o proceso hace lo que tiene que hacer

Validación de métodos(ISO 17025)

los laboratorios, deberán validar los métodos no estandarizados, los métodos diseñados y desarrollados en el laboratorio, los métodos estandarizados por fuera de su intervalos previsto o por ampliación de sus aplicaciones

Métodos susceptibles de ser validados

Ensayos de identificación, ensayos de determinación de analitos, carácterísticas farmacoptenias, ensayo de limite de impurezas y su cuantificación, determinación de analitos en fluidos biológicos y productos naturales, ensayos microbiológicos.

Los métodos pueden ser

Método normalizado( farmacopeico y compendidado), método normalizado- modificado, método no normalizado

Etapas de una validación.-

fase de desarrollo, validación, aplicación

Documentación de validación

- protocolo de validación, realización de la validación, evaluación de los resultados analíticos, informe de validación, certificado de validación

Tipos de validación

Prospectiva

Proceso de validación para metodologías nuevas retrospectivas.-
Para métodos utilizados a diario no validados anteriormente y de los cuales se dispone de suficiente documentación para probar la bondad del método

Qué y cuándo se debe validar: instrumental.-

 antes de uso de rutina sistema de computo.-
durante y al final del proceso de desarrollo, durante el proceso de instalación, antes y durante el uso de rutina y luego de actualizaciones.

Método analítico.-

antes del uso de la rutina y luego de algún cambio en los parámetros del método.

Sistema analítico

- deben verificarse los parámetros de aceptación antes y durante el proceso de rutina

Parámetros de validación

1. Selectividad.-

   
   capacidad de un método analítico para medir y identificar simultanea o separadamente los analitos de interés, en presencia de otras sustancias químicas que puedan estar presentes en la muestra
2. por adicción de las interferencias.-
   

1. técnicas confirmatorias para productos de degradación.- ensayos de degradación, hidrolisis( reflujo H2O 1 hr,hidrolisi acida, hidrolid alcalina)

Selectividad método analito: puebas de identificación.-

se debe demostrar que el método funciona en presencia de otras sustancias que puedan interferir y de otros compuestos relacionados pruebas de pureza.
Se debe demostrar que el método analítico permite evaluar las impurezas que se pretenden analizar cuali o cuantitativamente en pruebas de cuantificación.-
cuando se determina la puerza de una materia prima o el contenido de un principio activo u otro componenete en un medicamento, se debe asegurar que la señal observada procede únicamente del analito sin ninguna interferencisa de excipientes, productos de degradación y impurezas.

1. Linealidad y rango.-

   
   linealidad(es la capacidad del método para proporcionar resultados que son directamente proporcionales a la concentración del analito en la muestra dentro de un rango establcido).
   Rango(se define como el intervalo entre la concentración superior e inferior del analito para el cual se ha demostrado la correcta presicion, exactitud y linealidad.
   
2. 
   

   Precisión.-

   expresa el grado de concordancia entre una serie de medidas de tomas múltiples a partir de una misma muestra homogénea en condiciones prescritas. Se expresa como el CV coeficiente de variación presicion.-
   

   A) repetibilidad:

   medida de la presicion del método cuando éste se realiza por el mismo analista, el mismo día   mismos reactivos, mismo instrumento b)  presicion intermedia:
   determina la precisión dentro de un laboratorio cuando el métodos dse fectua con diferentes analistas, con diferentes equipos o en diferentes días c) reproducibilidad:
   mide el grado de concordancia entre resultados de ensayo indiviales obtenidos sobre la misma muestra con el mismo método pero en diferentes laboratorios con diferentes analistas, empleando diferentes equipos no necesariamente intervalos cortos de tiempo
3. Exactitud.-
   concordancia entre el valor determinado y el valor verdadero
4.  limite detección LOD (la mínima concentración o cantidad de anlito que presenta una respuesta que es significativamente diferente de la respuesta del blaco Y= YBR+3SDBR Limite de cuantificación.-LOQ el limite de cuantificación de un analito por un procedimiento analítico individual corresponde a la más baja cantidad del analito que puede determinarse cuantitativamnete con presicion y exactitud aceptbles (ICH)( USP)

Se determina por:

1. Determinación la relación señal/ruido se evalúa la respuesta (r) producida por el blanco de la muestra o matriz y la misma se compara con la respuesta(s) de muestras preparadas mediante la edición de pequeñas cantidades de analito al respectivo blanco. RUIDOx3=LOD=S      RUIDOx10=LOQ=S
2. Estudio de la menor  cantidad detectablese determina mediante el analisi de muestras con cantidades o contraciones conocidas de anlito y estableciendo el nivel mínimo en el que este puede detectarse con confianza
3. Apartir del valor de la ordenada al origen empleando el valor del intercepto (a) hallado en el ensayo de linealidad. El limite inferior de la repuesta se toma como 3ª y el limite de detecion como 3 a/b(AEFI)
   
4. 
   Analiss repetido del blanco de la muestra determinando la magnitud de la respuesta de fondo analizando un cierto número de blancos de la muestra y calculando luego la desviación tipo de la muestra y calculando luego la desviación tipo de la respuesta (S)

1. Robustez.-

   
   de un método analito es la medida de su capacidad para permanecer inalterado, ante pequeña variaciones de ciertos parámetros.
2. 
   

   Sensibilidad.-

   capacidad de un método de analisi para discriminar pequeñas diferencias en concentración o masa del analito