Pruebas bioquímicas y medios de cultivo en microbiología: resumen

Resumen

El documento resume las principales pruebas bioquímicas de identificación bacteriana, como la bilis esculina, la catalasa, el agar sal manitol, la prueba PYR y el test de CAMP. También describe medios de cultivo comunes como el agar sangre, el agar chocolate y MacConkey, y explica la clasificación de los medios en enriquecidos, selectivos, diferenciales y cromogénicos.

Puntos clave

La prueba de bilis esculina detecta la hidrólisis de esculina en presencia de sales biliares, produciendo esculetina y glucosa.
La catalasa descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno, lo que se observa como burbujas al añadir H₂O₂.
El agar sal manitol es selectivo y diferencial: contiene 7.5% de NaCl, manitol y rojo de fenol como indicador de pH.
La prueba PYR detecta la enzima L-pirrolidonil arilamidasa, que libera β-naftilamina.
El test de CAMP se basa en la sinergia entre la beta-hemolisina de Staphylococcus aureus y el factor CAMP de otras bacterias.
El agar MacConkey aísla bacilos Gram negativos fermentadores de lactosa y es selectivo y diferencial.
Los medios enriquecidos aportan nutrientes para microorganismos exigentes, los selectivos inhiben grupos no deseados, los diferenciales distinguen por pruebas bioquímicas y los cromogénicos por coloración enzimática.

Ponte a prueba

Pruebas Bioquímicas de Identificación

Bilis esculina: Esta prueba se basa en la capacidad de ciertos microorganismos de hidrolizar el glucósido esculina en presencia de sales biliares. El microorganismo hidroliza la esculina produciendo esculetina y glucosa.
Catalasa: Detecta la presencia de la enzima catalasa, que descompone el peróxido de hidrógeno (H₂O₂) en agua y oxígeno molecular. Cuando se agrega H₂O₂ a un cultivo bacteriano productor de catalasa, se observa la formación inmediata de burbujas debido a la liberación de oxígeno gaseoso.
Agar sal manitol: Es un medio selectivo y diferencial que contiene una alta concentración de cloruro de sodio (7.5%), manitol como carbohidrato fermentable y rojo de fenol como indicador de pH.
PYR: Detecta la presencia de la enzima L-pirrolidonil arilamidasa, que hidroliza el sustrato L-pirrolidonil-β-naftilamida liberando β-naftilamina.
Test de CAMP: Se basa en la sinergia entre la beta-hemolisina producida por Staphylococcus aureus y el factor CAMP producido por ciertas bacterias.

Medios de Cultivo Comunes

Agar sangre: Aislamiento de microorganismos (MO) nutricionalmente exigentes y visualización de hemólisis alfa, beta y gamma. Es un medio diferencial enriquecido.
Agar chocolate: Crecimiento de MO nutricionalmente exigentes (fastidiosos). Es un medio enriquecido, no diferencial.
MacConkey: Aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos, y fermentadores de lactosa. Es un medio selectivo y diferencial.
Cultivo nutritivo: Crecimiento de MO poco exigentes y la mayoría de las bacterias (ej. agar nutritivo). Propiedades: capacidad de ver hemólisis y morfología de crecimiento bacteriano general.

Clasificación de Medios de Cultivo

Medios Enriquecidos

Facilitan el crecimiento de MO exigentes o fastidiosos agregando sustancias nutricionalmente necesarias (ej. agar sangre, agar chocolate). Propiedades: hemólisis.

Medios Selectivos

Favorecen el crecimiento de un grupo de MO e inhiben otros (ej. agar MacConkey). Propiedades: resistencia a inhibidores, crecimiento de MO exigentes.

Medios Diferenciales

Diferencian bacterias basándose en pruebas bioquímicas (ej. agar MacConkey). Propiedades: fermentación de azúcares, activación enzimática, producción de ácidos.

Medios Cromogénicos

Diferencian especies por coloración enzimática. Propiedades: activación enzimática específica, diferenciación visual directa.

Preguntas frecuentes

¿Qué mide la prueba de catalasa?

Detecta la enzima catalasa, que descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno molecular. La formación inmediata de burbujas al agregar H₂O₂ indica un cultivo productor de catalasa.

¿Para qué sirve el agar MacConkey?

Se usa para aislar bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos, y fermentadores de lactosa. Es un medio selectivo y diferencial.

¿En qué se diferencia un medio enriquecido de uno selectivo?

Un medio enriquecido agrega sustancias nutritivas para favorecer el crecimiento de microorganismos exigentes. Un medio selectivo favorece el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibe otros.