Fundamentos de Pruebas Bioquímicas y Medios de Cultivo en Microbiología

Pruebas Bioquímicas de Identificación

• Bilis esculina: Esta prueba se basa en la capacidad de ciertos microorganismos de hidrolizar el glucósido esculina en presencia de sales biliares. El microorganismo hidroliza la esculina produciendo esculetina y glucosa.
• Catalasa: Detecta la presencia de la enzima catalasa, que descompone el peróxido de hidrógeno (H₂O₂) en agua y oxígeno molecular. Cuando se agrega H₂O₂ a un cultivo bacteriano productor de catalasa, se observa la formación inmediata de burbujas debido a la liberación de oxígeno gaseoso.
• Agar sal manitol: Es un medio selectivo y diferencial que contiene una alta concentración de cloruro de sodio (7.5%), manitol como carbohidrato fermentable y rojo de fenol como indicador de pH.
• PYR: Detecta la presencia de la enzima L-pirrolidonil arilamidasa, que hidroliza el sustrato L-pirrolidonil-β-naftilamida liberando β-naftilamina.
• Test de CAMP: Se basa en la sinergia entre la beta-hemolisina producida por Staphylococcus aureus y el factor CAMP producido por ciertas bacterias.

Medios de Cultivo Comunes

• Agar sangre: Aislamiento de microorganismos (MO) nutricionalmente exigentes y visualización de hemólisis alfa, beta y gamma. Es un medio diferencial enriquecido.
• Agar chocolate: Crecimiento de MO nutricionalmente exigentes (fastidiosos). Es un medio enriquecido, no diferencial.
• MacConkey: Aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos, y fermentadores de lactosa. Es un medio selectivo y diferencial.
• Cultivo nutritivo: Crecimiento de MO poco exigentes y la mayoría de las bacterias (ej. agar nutritivo). Propiedades: capacidad de ver hemólisis y morfología de crecimiento bacteriano general.

Clasificación de Medios de Cultivo

Medios Enriquecidos

Facilitan el crecimiento de MO exigentes o fastidiosos agregando sustancias nutricionalmente necesarias (ej. agar sangre, agar chocolate). Propiedades: hemólisis.

Medios Selectivos

Favorecen el crecimiento de un grupo de MO e inhiben otros (ej. agar MacConkey). Propiedades: resistencia a inhibidores, crecimiento de MO exigentes.

Medios Diferenciales

Diferencian bacterias basándose en pruebas bioquímicas (ej. agar MacConkey). Propiedades: fermentación de azúcares, activación enzimática, producción de ácidos.

Medios Cromogénicos

Diferencian especies por coloración enzimática. Propiedades: activación enzimática específica, diferenciación visual directa.