Impregnación argéntica (Masson-Fontana), viraje y tinción con Rojo Congo en histología

Resumen

El documento explica la impregnación argéntica, con sus conceptos de argirofilia y argentafinidad y la técnica de Masson-Fontana en dos tiempos, junto con el paso de viraje. Después describe la tinción con Rojo Congo para identificar sustancias amiloides, sus propiedades ópticas y cómo distinguir la amiloidosis AA de la AL.

Puntos clave

La impregnación argéntica usa iones de plata para visualizar estructuras con grupos -SH o -NH2.
Argirofilia: estructuras que forman compuestos insolubles con la plata y se tiñen de negro o marrón oscuro.
Masson-Fontana: impregnación con AgNO3 (30-60 min) seguida de reducción con NH4OH y NaN3 (10-30 min).
El viraje con tiosulfato de sodio (Na2S2O3) elimina la plata no unida y mejora el contraste.
El Rojo Congo identifica sustancias amiloides; con luz polarizada muestra un color verde manzana.
El amiloide es una proteína anormal de cadenas no ramificadas con lámina beta plegada que se deposita en espacios extracelulares.
El permanganato de potasio elimina la birrefringencia de la amiloidosis AA, pero no afecta a la amiloidosis AL.

Ponte a prueba

Impregnación Argéntica

La impregnación argéntica es una técnica histológica fundamental para visualizar estructuras celulares y tisulares que poseen grupos sulfhidrilo (-SH) o grupos amino (-NH₂). Este procedimiento utiliza iones de plata (Ag⁺) para la formación de compuestos insolubles.

Conceptos Clave: Argirofilia y Argentafinidad

Argirofilia: Es la capacidad de ciertas estructuras para unirse a los iones de plata y formar compuestos insolubles, los cuales se tiñen de color negro o marrón oscuro.
Argentafinidad: Se refiere a la capacidad de las estructuras para unirse a los iones de plata y formar compuestos solubles (que no se tiñen bajo estas condiciones específicas).

Técnica de Masson-Fontana

Esta es una variante de la impregnación argéntica diseñada específicamente para visualizar estructuras argirófilas. En este proceso, se emplea nitrato de plata (AgNO₃) e hidróxido de amonio (NH₄OH).

Método de Dos Tiempos

Etapa de impregnación: Las secciones histológicas se tratan con una solución de nitrato de plata (AgNO₃) durante un periodo de 30 a 60 minutos. Esto permite que los iones de plata penetren eficazmente en las estructuras argirófilas.
Etapa de reducción: Las secciones se exponen a una solución de hidróxido de amonio (NH₄OH) y azida de sodio (NaN₃) durante 10 a 30 minutos. Este paso reduce los iones de plata, formando compuestos insolubles que se depositan en las estructuras, permitiendo su visualización en tonos negros o marrones.

Viraje

El viraje es un paso adicional crucial para eliminar los iones de plata que no se han unido y así mejorar el contraste de la muestra. Para este fin, se utiliza tiosulfato de sodio (Na₂S₂O₃).

Tinción con Rojo Congo

El Rojo Congo es un método de tinción especializado utilizado para identificar sustancias amiloides. Se considera un colorante especial debido a sus propiedades ópticas únicas.

Cuando se observa una muestra teñida con este colorante bajo luz normal, aparece una mancha de color característica. Sin embargo, si se utiliza luz polarizada, la sustancia muestra un distintivo color verde manzana.

Propiedades Ópticas y Diferenciación

Esta técnica permite diferenciar la sustancia amiloide gracias a la propiedad de birrefringencia. Si se ilumina con una luz de una longitud de onda específica, el amiloide teñido cambia de color, un fenómeno conocido como el dicroismo del Rojo Congo.

La Sustancia Amiloide

Se define como una proteína anormal compuesta por largas cadenas no ramificadas con una configuración de lámina beta plegada. Esta proteína tiende a depositarse en los espacios extracelulares de diversos órganos.

Identificación de Amiloidosis Secundaria (AA)

Es posible distinguir la amiloidosis secundaria (AA) de otros tipos mediante el uso de permanganato de potasio. Este reactivo desnaturaliza la cadena AA, eliminando su birrefringencia característica al ser tratada con Rojo Congo. Por el contrario, la amiloidosis AL no se ve afectada por este tratamiento químico.

Preguntas frecuentes

¿Qué diferencia hay entre argirofilia y argentafinidad?

La argirofilia es la capacidad de unirse a la plata formando compuestos insolubles que se tiñen de negro o marrón oscuro. La argentafinidad se refiere a la unión con la plata que da compuestos solubles, que no se tiñen en estas condiciones.

¿Para qué sirve el viraje en la impregnación argéntica?

El viraje se usa para eliminar los iones de plata que no se han unido a las estructuras, con tiosulfato de sodio, y así mejorar el contraste de la muestra.

¿Cómo se distingue la amiloidosis AA de la AL con Rojo Congo?

Se trata la muestra con permanganato de potasio: este reactivo desnaturaliza la cadena AA y elimina su birrefringencia con Rojo Congo, mientras que la amiloidosis AL no se ve afectada.