Fundamentos Esenciales de la Microbiología: Cultivo, Esterilización y Manipulación de Muestras

Aspectos Clave en el Cultivo y Manipulación Microbiológica

1. Composición de los Medios de Cultivo

¿Qué elementos pueden formar parte de la composición de los medios de cultivo?

• Carbono y nitrógeno.
• Sales minerales.
• Factores de crecimiento.
• Factores de arranque (o específicos).
• Agua.

2. Clasificación de los Medios de Cultivo según su Finalidad

¿Cómo se clasifican los medios de cultivo basándose en el criterio de finalidad?

Los medios de cultivo se clasifican en:

• Medios ordinarios.
• Medios enriquecidos.
• Medios diferenciales.
• Medios selectivos.
• Medios de enriquecimiento.
• Medios de identificación.

3. Condiciones Estándar para la Esterilización en Autoclave

¿Cuáles son las condiciones estándar para esterilizar medios de cultivo en el autoclave?

El medio de cultivo ya preparado y contenido en el Erlenmeyer, tapado con algodón graso y cubierto con papel de aluminio, debe ser esterilizado en autoclave. La mayoría de los medios se esterilizan bajo las siguientes condiciones:

• Temperatura: 121 °C.
• Presión: 1 atmósfera de presión.
• Tiempo: 15 minutos.

4. Definiciones Clave en el Laboratorio de Microbiología

Defina los conceptos de cepa, sembrar, inóculo y resembrar.

Cepa

Es el conjunto de microorganismos pertenecientes a una misma especie que existe en un cultivo o colonia.

Sembrar

Es cuando se introduce de modo artificial una mínima parte de una muestra en un medio de cultivo apropiado, con el objetivo de averiguar si los microorganismos son capaces de desarrollarse.

Inóculo

Es la porción de la muestra que se pone en contacto con el medio de cultivo.

Resiembra

Alude a la transferencia de una muestra microbiológica (inóculo) desde un medio de cultivo a otro.

5. Normas Generales de Manipulación de Cultivos

Exponga las normas generales de manipulación de cultivo citadas en la unidad.

1. El asa de siembra se esteriliza por flameado con la llama del mechero *Bunsen*, antes de tomar la muestra y después de inocularla. Es crucial esperar a que el asa se enfríe antes de tocar la muestra para evitar la generación de aerosoles y la muerte de los microorganismos.
2. Antes de resembrar cultivos líquidos, es necesario homogeneizarlos mediante la agitación del tubo.
3. Los cultivos se manipulan a temperatura ambiente del laboratorio. Si están refrigerados, deben atemperarse antes de utilizarlos.
4. Al efectuar resiembras, es conveniente trabajar con cultivos recientes, como máximo de 24 horas de evolución.

6. El Cultivo en Anaerobiosis

Explique en qué consiste el cultivo en anaerobiosis.

El cultivo en anaerobiosis se utiliza para cultivar gérmenes anaerobios estrictos, incapaces de desarrollarse en presencia de oxígeno. Para ello, se utilizan sistemas herméticos como bolsas de anaerobios, jarras de anaerobios o cámaras de anaerobios. En estos sistemas se genera una atmósfera rica en CO₂ que desplaza el oxígeno, gracias a una reacción química controlada.

7. Clasificación Microbiana en Función de la Temperatura

¿Cómo se clasifican los microorganismos en función de la temperatura de incubación?

En función de la temperatura de incubación, los microorganismos se clasifican en:

• Mesófilos.
• Termófilos.
• Psicrófilos.