Digestivo

I. OBJETIVOS.
identificar la actividad de algunas enzimas específicas presentes en el tejido animal como la citocromo oxidasa y la succínico deshidrogenasa, mediante el uso de aceptores electrónicos coloreados e identificar el efecto inhibitorio de algunas sustancias sobre este sistema enzimático.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO.
Cadena de transporte de electrones La cadena de transporte de electrones o fosforilación oxidativa es un proceso que se lleva a cabo en la membrana interna mitocondrial y está constituido por una serie de complejos enzima-coenzima de oxidorreductasas y ferroproteínas. La actividad del complejo citocromo C oxidasa puede demostrarse mediante la oxidación de sustancias como la p-fenilendiamina (pFDH2) en presencia del sistema de citocromos. Esta sustancia es muy reactiva así que se condensa y polimeriza fácilmente originando mezclas de pigmentos oscuros. El ciclo de Krebs y la succinato deshidrogenasa (SDH). La succinato deshidrogenasa es una enzima que se encuentra asociada a la membrana interna de la mitocóndria. Es inhibida en forma competitiva con la presencia de otros ácidos dicarboxílicos como el malonato, malato, oxalacético y oxálico, los cuales se unen fuertemente al sitio activo de la enzima, lo que genera la acumulación de succinato. El proceso se puede evidenciar in vitro mediante el uso e un aceptor electrónico artificial como el azul de metileno, que es coloreado cuando se encuentra oxidado e incoloro cuando se reduce, en la medida en que se reoxida la coenzima FAD. Cuando el azul de metileno se encuentra en contacto con el oxígeno del aire, se reoxida tomando la coloración azul y formando peróxido de hidrógeno, por esta razón el sistema se aísla mediante una capa de aceite mineral.