Cromatografia: Tècniques, Fases i Aplicacions

Cromatografia: Tècniques i Fonaments

La cromatografia d'adsorció utilitza una fase estacionària sòlida i una fase mòbil líquida o gasosa. El solut s'adsorbeix a la superfície de les partícules sòlides. La separació dels diferents soluts s'explica per l'equilibri entre les fases estacionària i mòbil.

Cromatografia d'intercanvi iònic

Està relacionada amb la determinació d'ions que es basen en l'ús de resines d'intercanvi iònic. Les columnes recobertes amb resines d'intercanvi catiònic o aniònic es poden dissoldre fàcilment amb mescles d'aquests. Es basen en equilibris d'intercanvi entre els ions d'una dissolució i els ions del mateix signe que es troben a la superfície d'un sòlid d'elevada massa molecular.

Cromatografia d'exclusió molecular

S'aplica particularment a espècies d'elevat pes molecular. Els rebliments estan constituïts per partícules polimèriques o de sílice que contenen una xarxa uniforme de porus.

Cromatografia d'afinitat

Fa ús d'interaccions específiques entre una classe de molècules de solut i una segona molècula que està unida covalentment a la fase estacionària.

Separar 6 esteroides de columna 9.4 x 150mm farcida de fase enllaçada químicament de C8 amb partícules de 5 micròmetres. La fase mòbil utilitzada era una mescla amb un 40% d'acetonitril i 60% d'aigua. Variació de la fase mòbil. Raona la resposta. El que varia de la fase mòbil és la seva composició. Per a una millor resolució, el que modifiquem són els percentatges d'aigua i d'acetonitril. En aquest cas, augmentem el percentatge d'aigua.

Tr si s'utilitza una columna farcida amb fase enllaçada químicament C18? Perquè? El Tr serà més gran, perquè hem passat d'una cadena de 8 carbonis a una de 18. Com que la cadena és més llarga, la mostra tarda més a sortir, per tant, obtenim un Tr més gran.

Cromatografia de Líquids

Justifica la polaritat dels compostos 1, 2, 3 i 4. Com que la composició de la fase mòbil té un 94% d'aigua, que té una gran polaritat, això implica que l'ordre d'elució indica la polaritat més alta dels components.

Justifica si es tracta de fase normal o inversa. Es tracta d'una fase inversa perquè la fase mòbil és molt polar, ja que és aigua.

Fases estacionàries i mòbils en cromatografia de fase enllaçada químicament? Com es preparen les fases estacionàries? Fases mòbils: acetonitril, metanol, solucions tampó i aigua, entre d'altres. Fase estacionària: siloxans que es preparen a partir de Si-O-Si(Me)2-R, on el primer Si forma part de la superfície del suport (partícula de sílice). Per tant, variant el grup R s'obtenen diferents fases amb diferents propietats. El grup R és el responsable de la diferent interacció amb els analits a separar. Com que la partícula de rebliment té gran quantitat de grups silanol (Si-OH) i tots no poden reaccionar amb el Cl-Si(Me)2R per problemes d'espai, quedarien molts OH que proporcionen una polaritat elevada poc desitjada. Per evitar això, es desactiven fent-los reaccionar amb Cl-SiMe3, que és més petit.

Descriu els diferents tipus de cromatografia de líquids existents segons la interacció existent entre l'analit, fases mòbils i estacionàries.

Cromatografia de repartiment

Utilitza una fase estacionària líquida que forma una fina pel·lícula sobre la superfície d'un suport sòlid. El solut està en equilibri entre el líquid estacionari i la fase mòbil.