Clasificación y Mecanismos de Tinción en Histología: Una Visión Completa
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Clasificación de las Coloraciones Histológicas
La clasificación de las coloraciones histológicas se puede realizar atendiendo a diferentes criterios:
Según el componente coloreado
Coloraciones Topográficas
Dan una visión de conjunto de la estructura de un tejido. Ejemplo: Hematoxilina-Eosina (Htx-Eo).
Coloraciones Citológicas
Permiten un estudio más íntimo de las estructuras celulares. Ejemplo: Papanicolaou, Panóptico Rápido.
Coloraciones Histoquímicas
Intentan poner en evidencia sustancias químicas o una función química determinada. Ejemplo: PAS, Perls.
Coloraciones Estructurales
Ponen en evidencia estructuras tisulares. Ejemplo: MSB, Masson (colágeno), Orceína (tejido conectivo), Impregnación Argéntica (reticulina).
Según el procedimiento de coloración
Coloración Directa
Tiñe el tejido simplemente por la afinidad de ambos. Ejemplo: Eosina.
Coloración Indirecta
El colorante necesita de la acción de un acentuador o mordiente.
Mordiente
Es toda sustancia que actúa como eslabón entre el tejido y el colorante. Ejemplo: Ácido Crómico, Permanganato de Potasio.
Acentuador
Sustancia que provoca un aumento en la selectividad o intensidad de la tinción sin actuar como eslabón. Ejemplo: Fenol.
Cuando el tratamiento del tejido con el colorante y el mordiente se realiza simultáneamente en una misma solución, se llama laca. Esta coloración se denomina indirecta de un tiempo. Cuando el colorante y el mordiente o acentuador actúan separados, se llama coloración indirecta en dos tiempos.
Coloración Progresiva
La coloración es detenida en el momento en que se ha obtenido el color deseado.
Coloración Regresiva
Es aquella en la que primero se colorea y luego se elimina el exceso de colorante a través de la diferenciación. Ejemplo: Etanol, Acetona.
Impregnación
Es un método basado en el depósito de precipitado de sales de metales pesados sobre o en el interior de células y constituyentes tisulares.
Mecanismos de Coloración
Mecanismo Físico
Están ligados a las propiedades de disolución (el colorante es más soluble en el tejido que en el disolvente) e impregnación (por su gran volumen molecular o por precipitación selectiva, queda atrapado entre la malla de células y fibras que forman el tejido).
Mecanismo Químico
Reacción química entre el colorante y la estructura, dando lugar a un nuevo colorante.
Mecanismo Físico-Químico
Se produce por atracción electrostática entre el colorante y el tejido.
Clasificación de los Colorantes
Atendiendo a su origen
Colorantes Naturales
Son escasos y se obtienen a partir de ciertas plantas e insectos. Ejemplo: Hematoxilina, Carmín, Safranina.
Colorantes Artificiales
Son muy numerosos, derivados de la anilina.
Atendiendo a su grupo cromóforo
Colorantes Nitrados o Nitrosados
Contienen grupos nitro (-NO₂) o nitroderivados (-N=O) del benceno o naftaleno con algunos grupos hidroxilo o amino. Ejemplo: Ácido Pícrico.
Colorantes Azoicos
Contienen el grupo -N=N- como unión de anillos derivados del benceno o antraceno.
Colorantes Derivados de la Antraquinona
Obtenidos a partir de la oxidación del antraceno.
Colorantes Derivados de la Acridina
Contienen el cromóforo =C=N- (imino).
Colorantes Derivados de Iminas Quinónicas
Se clasifican en oxacínicos, tiacínicos, acínicos.
Colorantes Derivados del Difenilmetano (Auramina) y del Trifenilmetano (Fucsina)
Cuyo cromóforo es =C=CH.
Colorantes Derivados del Xanteno
Con cromóforos variables.
Colorantes Derivados de las Ftalocianinas
Como el Azul o Amarillo Alcian, que poseen una molécula que recuerda al anillo hemo de la hemoglobina.
Atendiendo a los grupos auxocromos
Colorantes Básicos
Son aquellos con grupos auxocromos catiónicos, responsables de la carga global del colorante. Se utilizan para colorear estructuras ácidas, principalmente los ácidos nucleicos (carga positiva). Ejemplo: Lacas de Hematoxilina.
Colorantes Ácidos
Son aquellos con grupos auxocromos aniónicos, que son los responsables de la carga global del colorante. En general, tiñen estructuras básicas contenidas en los citoplasmas celulares. Ejemplo: Eosina.
Colorantes Neutros
Son aquellos que no son ni ácidos ni básicos, sino sales. Ejemplo: Eosina de Azul de Metileno.
Colorantes Indiferentes
Son aquellos que no poseen un carácter ácido-básico o salino definido, por lo que habitualmente colorean los tejidos por impregnación física.
Colorantes Metacromáticos
La mayor parte de los tejidos se tiñen igual que el colorante utilizado; esto se llama ortocromasia. Cuando se utilizan ciertos colorantes básicos derivados de la anilina, algunas estructuras tisulares se tiñen de un color diferente al del colorante; esto se llama metacromasia, y las estructuras así teñidas se denominan cromótropas.