Biopsia de Vellosidades Coriales: Procedimiento, Preparación y Técnicas

La biopsia de vellosidades coriales es un procedimiento que consiste en la introducción de un catéter, aguja o instrumento de biopsia en el interior del corion frondoso por vía transcervical o transabdominal para obtener una muestra de tejido.

Preparación de la Muestra

Las vellosidades coriales pueden ser procesadas mediante dos métodos:

• Preparación directa: El resultado está disponible en 3-4 días.
• Cultivo del tejido corial: Requiere 6-8 días.

Complicaciones Potenciales

Aunque es un procedimiento generalmente seguro, existen algunas complicaciones potenciales:

• Pérdida del embarazo (aproximadamente en el 4% de los casos).
• Hematoma subcoriónico.
• Oligoamnios.
• Infección (puede producir corioamnionitis).
• Hemorragia transplacentaria.

Técnica Transcervical

Este procedimiento debe ser precedido por una evaluación ecográfica para determinar:

• Localización del corion.
• Estado de plenitud.
• Posición del útero.

Contraindicaciones

No se debe realizar en caso de cervicitis o vaginitis.

Procedimiento Detallado

1. Colocar a la paciente en posición de litotomía.
2. Realizar antisepsia del periné, vagina y cuello uterino.
3. Colocar un espéculo vaginal estéril para identificar el cuello uterino.
4. Fijar el cuello uterino con una pinza.
5. Identificar ecográficamente el trayecto a seguir con el instrumental de biopsia.
6. Introducir el instrumento bajo supervisión ecográfica.
7. Extraer la vía del catéter y conectar con una jeringa que contenga heparina para evitar la coagulación.
8. Succionar el material.
9. Revisar la muestra.
10. Colocar la muestra obtenida en medios especiales para su posterior análisis.

Técnica Transabdominal

Esta técnica presenta varias ventajas:

• Es más sencilla.
• La muestra obtenida suele ser de mejor calidad.
• La incidencia de complicaciones es menor.
• La paciente tolera mejor el procedimiento.

Práctica de Laboratorio: Toma y Procesamiento de la Biopsia

Toma de la Biopsia

Se realiza idealmente entre las semanas 10 y 14 de gestación. En este período, las vellosidades tienen un mayor diámetro y características óptimas para la obtención de metafases. La principal ventaja es la posibilidad de realizar un diagnóstico prenatal en el primer trimestre. Sin embargo, pueden obtenerse mosaicismos por contaminación materna y, en ocasiones, la calidad de las metafases puede ser limitada.

Lavado y Selección de la Muestra

La biopsia se recoge en tubos que contienen RPMI 1640 con antibióticos y heparina, donde puede conservarse hasta 24 horas. Este paso es crucial para eliminar posibles restos de tejido materno. El procedimiento se lleva a cabo de la siguiente manera:

1. Colocar la biopsia en una placa de Petri con medio de cultivo o solución salina estéril.
2. Visualizar la muestra con un estereomicroscopio.
3. Revisar todas las ramas, eliminando restos de coágulos con una aguja estéril.

Es fundamental que todo el material utilizado sea estéril y que el procedimiento se realice en una cabina de bioseguridad.

Cultivo y Obtención de Metafases

Cultivo Corto

En el tejido corial existen células que entran en mitosis de forma espontánea, lo que permite su análisis directo. Los pasos son:

1. Cultivar las vellosidades en una placa de Petri con medio de cultivo completo durante 24-48 horas a 37°C y 5% de CO₂.
2. Añadir colchicina para detener la mitosis en metafase.
3. Transferir a un tubo cónico, eliminar el medio de cultivo y añadir solución hipotónica.
4. Fijar y realizar varios lavados con un fijador de ácido acético y alcohol.
5. Disgregar el tejido con ácido acético al 60% y agitación mecánica.
6. Gotear la suspensión sobre portaobjetos limpios.
7. Teñir con bandeo G (opcional) para el análisis.

Cultivo Largo

Se basa en el cultivo de fibroblastos. Los pasos son:

1. Realizar una disgregación enzimática de la vellosidad, primero con pronasa y luego con colagenasa.
2. Sembrar la suspensión en placas o frascos con medio de cultivo completo.
3. Incubar a 37°C y 5% de CO₂ durante 4-5 días.
4. Controlar el crecimiento con un microscopio invertido hasta observar colonias con un número aceptable de mitosis.
5. Detener la mitosis en metafase con colcemid.
6. Realizar una tripsinización para despegar las células y transferirlas a un tubo Falcon cónico.
7. Realizar un choque hipotónico.
8. Fijar y lavar.
9. Gotear sobre un portaobjetos.
10. Teñir.