Que bacterias causan hemolisis en el agar sangre

PRUEBA COAGULASA

Fundamento

:Consiste en poner de manifiesto la enzima coagulasa que poseen algunosStaphylococcus. Estos gérmenes, incluidos en la especie Staphylococcusaureus son considerados patógenos. Actualmente se sabe que hay Staphylococcuscoagulasa

negativos, virulentos y productores de cuadros clínicos, como endocarditis o infecciones urinarias.

Medio de cultivo:

la prueba puede hacerse partiendo directamente de una colonia obtenida en la placa de aislamiento, pero es mejor utilizar un crecimiento de dieciochoveinticuatro horas obtenido en algún medio líquido enriquecido, como la infusión de

cerebro corazón (BHI).

Reactivo:

se utiliza plasma humano o de conejo.

Método:

se pueden seguir dos tipos de técnicas:

A) La pruebe del portaobjetos, que pone de manifiesto la coagulasa ligada

B) La prueba del tubo de hemólis, que pone de manifiesto la coagulasa libre

A) Prueba del portaobjetos

Depositar una gota de agua destilada estéril sobre un porta. Homogeneizar sobre ella una gota de suspensión bacteriana de veinticuatro horas en BHI. Añadir una gota de plasma junto al homogeneizado anterior y mezclar bien.

B) Prueba del tubo de hemólisis

Depositar 0,3 ml. De plasma dentro de un tubo de hemólisis y añadirle 0,1 ml. De un cultivo del germen en BHI. Mezclar suavemente por rotación del tubo, sin agitar. Incubar a 37ºC, preferiblemente en un baño de agua, observando el tubo cada treinta

minutos, hasta las cuatro horas.

Interpretación de los resultados

En la prueba del portaobjetos la reacción positiva se observa entre los quince y veinte segundos con formación de abundantes grumos de color blanco. Se considera negativa la prueba, si no hay aglutinación en tres o cuatro minutos. En el caso del tubo de hemólisis se considera como prueba positiva la formación de un coágulo, que se manifiesta al inclinar el tubo con cuidado. Los tubos se leen hasta las cuatro horas, pero no se da un resultado como negativo (ausencia de coágulo) hasta transcurridas veinticuatro horas. Algunos microorganismos que utilizan citrato pueden dar reacciones falsamente positivas cuando se usa dicho anticoagulante.

PRUEBA CATALASA

Reactivo:

agua oxigenada al 3%.

Método:

tomar con el asa una colonia de 24 horas y depositarla sobre el porta. Añadir con una pipeta una gota de agua oxigenada al 3%; lo que no debe hacerse es homogeneizar el asa con el cultivo sobre una gota de agua oxigenada depositada

previamente en el porta , pues produce falsos positivos. La prueba puede realizarse también añadiendo el agua oxigenada directamente sobre la placa que contiene un cultivo puro. Si la colonia procede de una placa de agar sangre puede dar falso positivos debido a la presencia de eritrocitos, que también poseen catalasa. No existe dicha posibilidad si procede de otro medio de cultivo, incluido agar chocolate.

Interpretación de resultados:

se considera la prueba positiva cuando se observa desprendimiento de burbujas de gas (O2).