Agentes Deshidratantes y Aclarantes en Histología

Resumen

Este apunte explica dos pasos de la preparación de muestras en histología: la deshidratación, que elimina el agua del tejido, y el aclarado, que sustituye el deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusión. Describe las características que debe tener cada agente, las ventajas y desventajas del alcohol etílico, el alcohol metílico, la acetona y el dioxano, y los riesgos del xileno.

Puntos clave

La deshidratación elimina el agua tisular, y el alcohol etílico es el agente deshidratante más utilizado.
Un buen agente deshidratante no altera la estructura tisular, se mezcla con el agente aclarante, actúa rápido, endurece poco y tiene poca toxicidad.
En la deshidratación con alcohol etílico influyen la graduación de los alcoholes, el volumen y número de baños, la duración y la introducción de la pieza.
El alcohol metílico es más barato y se emplea en frotis e improntas, pero es muy inflamable y tóxico.
El aclarado sustituye el deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusión.
El xileno es el aclarante más utilizado: es muy rápido y endurece poco el tejido, pero es tóxico y solo se puede usar desde alcohol absoluto.
El cloroformo y el tetracloruro de carbono no afectan al tejido, pero su acción es lenta y el tejido puede flotar.

Ponte a prueba

1. Deshidratación

Deshidratación: Eliminación de agua tisular.

Agua---------Alcohol

1.1. Características de un buen agente deshidratante

No debe alterar la estructura tisular.
Debe mezclarse con el agente aclarante.
Debe producir la deshidratación rápidamente.
Debe endurecer lo menos posible los tejidos.
Toxicidad y peligrosidad mínimas.

1.2. Agentes deshidratantes

Parámetros que intervienen en la deshidratación con alcohol etílico:

Graduación de los alcoholes
Volumen y número de baños de deshidratación
Duración de la deshidratación
Introducción de la pieza

Alcohol etílico:

Ventajas:
Es el más utilizado
Excelente deshidratante
Actúa rápido
No es tóxico

Desventajas:
Es muy inflamable
Es más caro que otros alcoholes.

Alcohol metílico:

Más barato
Se emplea en preparaciones de frotis e improntas.
Es muy inflamable y tóxico

Acetona:

Muy volátil
Aumenta la fragilidad del tejido
Acción rápida
Generalmente se utiliza en muestras que se van a mirar al microscopio electrónico

Dioxan:

Miscible en parafina
Tóxico, especialmente en espacios pequeños.

Alcohol isopropílico:

Sustituto del alcohol etílico
Miscible con diferentes componentes
No se puede utilizar si la inclusión se realiza en celoidina.

Tetrahidrofurano:

Acción rápida
No produce retracción tisular
Su uso no es muy habitual

Alcohol butílico:

Es lento
Miscible con parafina, que permite prescindir de los agentes aclarantes.

2. Aclarado

Aclarado: Método por el cual se consigue la sustitución del agente deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusión.

2.1. Características de los agentes aclarantes

Rapidez para eliminar el deshidratante
Baja acción tisular y celular
Compatibilidad con el medio de inclusión
Baja toxicidad o peligrosidad
Bajo coste

2.2. Agentes aclarantes

Xileno / Xilol:

Ventajas:
Es el más utilizado
Muy rápido
Bajo endurecimiento tisular
Se elimina con facilidad
Miscible en parafina

Desventajas:
Tóxico
Sólo se puede utilizar desde alcohol absoluto
Tiende a volver blanquecino el tejido
Su uso prolongado endurece mucho el tejido

Riesgos del Xileno:

Ingestión: Irritación gastrointestinal, pérdida de consciencia, nauseas y vómito.
Inhalación: Irritación de las vías respiratorias, dolor de cabeza y nauseas.
Piel: Un contacto prolongado puede provocar una dermatitis. Puede provocar efectos narcóticos.
Ojos: Irritación y enrojecimiento.

Tolueno:

Rápido
Menor endurecimiento tisular
No blanquea los tejidos
Puede conservar la muestra durante 12 horas.
Miscible con parafina
Tóxico
Solo se puede utilizar desde el alcohol absoluto

Benceno:

Relativamente rápido
No blanquea el tejido
Se elimina fácilmente
Muy tóxico
Altamente inflamable

Cloroformo:

No afecta al tejido
De acción lenta
El tejido suele flotar
Difícil de eliminar

Tetracloruro de carbono:

No afecta al tejido
Es más barato
Muy tóxico
El tejido puede flotar
Acción lenta

Dioxano:

Actúa como deshidratante y aclarante
Es inodoro y muy tóxico

Preguntas frecuentes

¿Qué es la deshidratación en histología?

Es la eliminación del agua tisular. Con alcohol etílico, sus parámetros son la graduación de los alcoholes, el volumen y número de baños, la duración y la introducción de la pieza.

¿Qué es el aclarado?

Es el método por el que se sustituye el agente deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusión. El agente aclarante debe eliminarse rápido, afectar poco al tejido y tener baja toxicidad y bajo coste.

¿Por qué es peligroso el xileno?

El xileno es tóxico. Por ingestión produce irritación gastrointestinal, pérdida de consciencia, náuseas y vómito. Por inhalación irrita las vías respiratorias, y un contacto prolongado con la piel puede provocar dermatitis.