Nutrición, crecimiento y taxonomía microbiana
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TEMA9:NUTRICION MICROBIANA:Cit tipos nutricionals microbians q conozk atndiend a forma d obtncion d enrgia:Fototrofos(luz) y quimiotrofos(oxidacion comp organikos o inorgankos).Aora dsd pdvista biosinttiko:Autotrofas:crecn sinttizando sus materials a partir sust inorganiks sncillas, y heterotrofas:fuent d C organik,aunq alg1os elmnts distints d C puedn sr kpta2 n forma inorg.Caractristiks M quimiolitrotofos:obtienn energia d oxidacion d sust organiks sncillas,el C procd d CO2,l rsto d elmntos a partir d sals inorg,x lo q vivn n solucions d sals minerals n ausncia d luz.Funcion d pptonas q s incluyn n medios d cultivo:Fuent d N2,sn 1idrolizao d proteins d lexe,carn y sopa.Dpndiend dl sustrat o mtod d idrolisis d la pptona pued sr ideal xra 1os medios d cultivo pro no pa otros.Funcion d xtractos q s incluyn n medios d cult:Fuent d N(n lugar d pptonas o a =tiemp),a partir d levadura o krn,s preparn mdiant coaguacion x klor d proteinas utilizads,puedn cntnr azukrs,vitamnas.Dif ntr medios nrikeci2(1)y medios d nriqcimiento(2):1.medios comuns a ls q s ls añad glucosa,sangr,q axtan factors d crecimient.Microorgansmos.2.Favorcn la multiplikcion d bacteria,inhibiend parcialmnt la d otras.Ej:Muller Kaufman:prmit crec d Salmonella y inhib parcial n d numerosos coliforms.Q s medio selctivo:Prmit crecimient d 1os M e impid l d otros:Ejmplo:medio S-S(salmonella-shigella)n vrd brillant inibe Gram+,y sales biliars inhibn a Gram- mnos a nterobacterias.Medio SAboureaud-Cloranfnicol,aisla Candica abicans.Un mdio tb pued acrs selct kmbiand cond d cultiv.Cit2agnts rductors:Acido ascorbiko,NADH,Hidroquinoma.TEMA10-11CRECIMIENT M:C it ls 4 fass dl crcimnto microbian.Fas d latncia:l inoculo(cnjunt d cel q añadims a 1mdio cultiv xra iniciar crec microbian)s adpta a condicions d medio frsco sobr l q s a sembrao,s 1 period d ajust metaboliko y su duracion dpnd d varios factores.Fase xponncial o logaritmik:s cnskuencia dircta d crec microbiano:gmacion o fision bacteriana.Mayor part d M crecn d forma xponncial,s la fas real d crecimiento.Fase stacionaria:el coeficient neto d crecimintse hac nulo,pero aun exist crecimnto.L crec bruto s ekilibra cn las muerts cel.N st period s agotn nutrients spcials y acumulan sustancias d dsxo.Fase d muerte cel:si s cntinua incubacion 1a vz alknzad la fas stacionaria las cel mpiezan a morirs,el nº total d cel cntadas al micros es cte,el nº d ufc?(lisis),s llaman discontinuos.Q s tasa d crec microbinao:L crecimnto microbiano s rfier al aumnt d comp celulars,tanto d ind cm d tamaño.la tasa se mid normalmnt n nº d duplikcion x ora.De q dpnd:kractristiks gntiks dl M,cndicions ambientals,los PRO crcn +rapid q EU,ants d mpzar cualquier procso hay q optimizar cond n las q s ncuentra org.Xq ntra n fase stacionaria 1cultivo:Xq s akba alg1 nutrient o alg1 componnt del mtabolism microbian s toxico,n sta fas no?ni?nºd cel.Q s kimiostato:S yama asi cuand s controla/mantien cte la[]d nutrients.Def cultivo puro:cnjunt o poblacion d cel q s obtienn x fision binaria d1a sola cel,en micro siempr trabaja cn ellos,ai q aislarlos,tien q star n cndicions aspsia.2 mto2 d consrvacion d M y n q cnsist:1.N medios d cultiv:Siembr d slat(lengueta n la q podmos smbrar al M cogiend la colonia cn asa d bucl y smbrand cn strias)/incubacion/guardar a 4º una vz q cultivo crecio.Ltubo d cpa s rellena cn medio d cultiv adecuad y s añad agar xra q solidifiq.2.Congelacion:s coge colonia n cultiv puro,s pasa a mdio likid,incubams a Tªoptima d crecimnto.Cuando ai crecimnt al tubo o alicuota s añad criopresrvativ(glicrol)q prmit bajar Tª d consrvacion sin q l tubo congle.Pued ocurrir a -20-80ºC.Clasif d M n funcion d Tªoptima d crecimnto:1.Psicrofilos:optima a 15ºC aunq tb crecn n intrvalo0-20ºC.2.Mesofilos:optima ntr20-45º,min a 15 max a45.Termofilos:optima ntr 55-65º.Hipertrmofilo:optima ntr 85-113 n adlant s sigun studiand.PCR.Def Maerobio facultativo(1)y anaerobio aerotolerant(2):(1)crecn mejor n prsncia d oxign pero tb n ausncia dst.(2)toleran oxigno pero no crecn mejor.Dif entre barofilicos(1)y barotolerantes(2):(1)necesitan la presion xra crecr,(2)toleran la presion.TEMA14:TAXONIMIA MICROBIANA:Cncepto d sp microbiana:colcion d cpas q cmpartn numeross propiedads stabls q difiern d form signifiktiva d otros grups d cpas.la mayor part no s puedn cruzar ntr si,xello ai otra def d sp.Cncpt d cepa:s 1a P d org q dsciend d1unik organism o d aislamnto n cultiv puro.ekivala cultiv puro.la cpa tipo s la 1ª q s aisla y cn la q s cmpara cn d+,no tien xq sr la + reprsntativ.Nombr d manual d clas d M:Manual d Bergey,toda klsifikcion d bacterias conocids q pued utilizars n idntifikcion d sp bacterianas,2 edicions.En q cnsist Pruba dl Indol:capacidd d M xra producir 1a triptofasa q hidroliza l triptpfan indol.Si l tubo produc indol tien q aber triptofano.N l tub d muestra s añad gotas d reactivo Kovac's q reacciona cn indol y da un cor rojo.Prueba positiva si n superficie tubo anillo rojo,negativa si anillos transparnt amarillnt.Voges-Proskauer:dtrmina kpacidad d 1org xra producir acetilmetilcarbinol a partir d ac.organicos resultants dl metabolism d glucosa.el acetilmetilcarbinos reaciona con alfanaftol n presncia d KOH(40%)y s oxidao a diacetilo,q reaciona cn guanidina y forma conplej d cor rosa.Si color transparnt es negativa la prueba,la prueba s positiva si ai color rojizo n superficie tubo.Pruba dl citrato:Dtrmina la kpacidad d 1org xra frmntar citrato cm unik fuent d C.algunos Musan citrato permeasa xra facilitar ntrada d glusosa o lactosa.El citrat s metalizado a ac piruvico +CO2 alkalinizao n cultiv.El cultivo lleva l indicador d pH azul d bromotimol(Verd:acido,Azul:medio alklino)Alklinizacion no solo cnscuencia d metabolizacion d citrato.Prueba rojo d metilo:dtrmina kpacidad d un M xra oxidar glucosa producindo ac lactico y formico.La producion d ac s dtctada mdiant indikdr rojo d metilo q cntien l medio o los propios M.El medio d cultivo s trasparnt,si el M produc ac st kmbia a rojo y si no s amarillo.prueba n tubo o plak.Todas las prubas s llaman IMVIC.