Quimica

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Sangre:
Orientación: basadas en accion catalitica de hemoglobina q aprovecha la presencia de peroxidasas q descomponen al agua oxigenada en presencia de un sustrato: Adler (sol acética de bencidina+agua oxigenada=azul); Kastle Meyer (fenoftaleina+OHK=coloración roja + zinc=se calienta hasta q se pone incolora. Sobre un hisopo tengo la muestra+reactivo+agua oxigenada=rojo por oxidación de fenoftaleina).
Certeza: Teinchman (ac.acético glaciar+muestra=prismas castaños de clouro de hemina); Takayama (piridina+OHNa+glucosa+muestra=placas rojo anaranjadas)
Semen:
Florence: lugol+muestra=agujas rojas para colina (yoduro de colina)
Barberio:ac. Pícrico+muestra= pricato de espermina (agujas amarillas refractantes)
Electroforesis: primero se separa la espermina de los aminoácidos de semen. Se deja secar el papel y se gira 90º para hacer cromatografía. Se revela con nihidrina calentando en estufa a 80º. Falencia: no estudia simultáneamente la colina. Solución: corrida electroforética en papel (fase móvil: piridina,ac acético y agua) en paralelo con testigos de espermina y colina. Se calienta a 80º para eliminar piridina q interfiere con Dragendorff. En corrida de una hora 50m a 350 volts la espermina migra 14,5 cm y la colina 17 cm. Después se gira el papel y se hace la cromatografía con fase móvil ClH, butanol y agua. Colina se revela con Dragendorff (rosa) y espermina con reactivo yodoplaminico (purpura).
Electroforesis para fosfatasa ácida: se colocan las muestras en soporte de almidón en placa de aclidina y se hace electroforesis. Luego se coloca un papel encima trasfiriendo la FA al mismo. Se revela con fosfato de umberifenol q es hidrolizado por la FA quedando metil umberiferona, q es fluorescente. La FAP es mucho mas fluorescente q las demás FA. La FA sanguínea no se detecta.
Inmunoensayos: rápidos, económicos y seguros. ;
HAI: tenemos:1) Suero anti HGC ; 2) Orina de la paciente ; 3) Hematíes recubiertos con HGC ; Si 1 y 2 se unen, 3 no se puede unir, se inhibe hay Embarazo . Si 1 y 2 no se unen, se unen 1 y 3 hay Aglutinación y No embarazo
LAI: igual que HAI pero en vez de Hematíes, usan partículas de Látex recubiertas con HGC.
Test directo: se recubren los Hematíes o las partículas de Látex con anticuerpos anti HGC. Si la orina tiene HGC se produce aglutinación à Embarazo.
Radioinmunoensayo: es un ensayo por competición. Tenemos:
1) Anticuerpo
2) Antigeno (orina del paciente)
3) Antigeno * marcado con un isótopo radioactivo.
Confrontamos 1 con 2, si se produce el complejo AgAc, cuando agreguemos Ag* no se va a producir nada porque el anticuerpo ya esta ocupado. A mas AgAc, menos Ag*Ac.



Enzimoinmunoensayo (ELISA): se usan posillos plásticos tratados que tienen gran afinidad por proteínas. También se usan anticuerpos y antigenos marcados con una enzima. Hay 4 tipos:
- Directo: se pone la orina (tiene antigeno) en el posillo. Después se agregan los anticuerpos marcados con enzima. Si la orina tiene HGC se forma el completo AgAc. Después se lee por espectrofotometría la densidad óptica.
- Indirecto: se pone la orina en el posillo (antigeno). Después se pone anticuerpo anti-HGC NO marcado. Después se coloca un anticuerpo anti anticuerpo anti-HGC marcado. De estos últimos se pueden unir 2 o más al primer anticuerpo que pusimos. Es el sistema más popular.
- Competitivo: se pone el po c illo + anticuerpo + antigeno (orina). Se deja incubar para que se forme o no el complejo AgAc. Después se agrega un Ag*. Entonces:si se formo antes el AgAc, con Ag* no va a pasar nada ( Embarazo ) S i no se formo AgAc, ahora se va a formar Ag*Ac, queda un complejo marcado, el cual indica que NO hay embarazo.
- Sándwich: se pone el posillo con anticuerpo + muestra con antigeno (orina c/HGC) + 2do anticuerpo anti-antigeno marcado. Esto permite una gran amplificación.
Enfermedades venéreas:
Sífilis: treponema pallidum (bacteria basilo: se mueve como un resorte)
Gonorrea: diplococo neiseria gonoroheae.
Trichonomiasis: trichomona vaginalis. Única fase son trofozoitos.
FAP: fosfatasa ácida prostática. La direncia con las otras FA es q el acido tartarico la inhibe.

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