Instrumento para medir la cantidad de sustancia

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FLUORESCENCIA

FUNDAMENTO

El elemento absorbe fotones Desde el nivel de vibración fundamental hasta cualquiera de los niveles Vibracionales. Cuando se produce la relajación, lo hace por distintos caminos:

­Por un lado la energía se libera en forma De calor.

­Otra parte en radiación EM, cuya longitud De onda es mayor que la longitud de onda incidente.

APLICACIONES

La espectroscopia de fluorescencia se utiliza para medir compuestos aromáticos. Estos varían su Fluorescencia en función de los grupos unidos al anillo aromático.

Para el análisis bioquímicos de La medida de proteínas en la estructura proteica encontramos grupos aromaticoa En los grupos de las cadenas laterales de los AA. Los AA que poseen son:

­Fenilalanina (Phe)

­Tirosina (Tyr)

­Triptófano (Trp)

Trp>Tyr>Phe 

La Phe es la que tiene menor Absortividad

FOSFORESCENCIA

FUNDAMENTO

Las moléculas absorben energía Pero la retienen y la emiten de forma gradual y retardada. Esto se debe al Cruce de sistemas en estado excitado. El resultado es un tiempo de vida media Mayor que en la fluorescencia. 

Otra diferencia con la fluorescencia Es que la fosforescencia solo la observamos a baja temperatura y se observa Mejor en estados viscosos. Sin embargo la fluorescencia se puede dar en Solución o en estado liquido o gaseoso.

Instrumentación

·Elementos adicionales:Un primer dispositivo que irradia la Muestra y que después de la relajación, mide la intesidad de la energía.Un segundo dispositivo retardador para Poder medir la fosforescencia y no la fluorescencia.

El recipiente donde almacenamos La muestra es distinta respcto a los usados en fluorescencia ya que es un Recipiente preparado para soportar las temperaturas del nitrógeno liquido (-80ºC).

APLICACIONES

Es mas sensible y mas selectiva Que la fluorescencia. Se utiliza para determinar fármacos en fluidos Biológicos, drogas, intoxicaciones y en marcadores de enfermedad con grupos Cromóforos en su estructura. 

A veces se forman compuestos Con otras estructuras químicas para poder medir por fosforescencia alguna Sustancia de interés.

QUIMIOLUMINISCENCIA

La excitación de las moléculas Se produce por una reacción química. Se produce en estado de transición de las Sustancias antes de que se formen los productos, es decir, en el transcurso de Su formación, donde tienen un tiempo de vida muy corto.

APLICACIONES

Es la menos utilizada para Determinar parámetros químicos, pero en inmunoterapia para la detección Ag-Ac.


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