Coloración y tinción basica de muestras

TIPOS DE COLORANTES NUCLEARES: Coloración del rojo neutro: Con esta coloración son posibles todas las fijaciones. Los núcleos se tiñen de rojo vivo. Es muy útil cuando las coloraciones del conjunto son azules y hay que resaltar los núcleos, confiriéndoles un color distinto ( es utilizado también como colorante de contraste). Lacas de hematoxilina: La hematoxilina es el colorante nuclear más utilizado. Es un colorante vegetal que se extrae a partir del palo de campeche. La hematoxilina es una sustancia orgánica, cristalizada, amarillenta, que se presenta bajo forma de pepitas de color amarillo claro, y no tiene la propiedad de teñir por sí misma, pero tras su oxidación, al exponerse al aire o luz, se convierte en hemateína, que es capaz de colorear de forma muy activa. La hemateína, colorante ácido, presenta en solución ácida un color amarillo-rojizo y no se presta para tinciones. Para la coloración de los núcleos es necesario un tratamiento con mordientes. La hematoxilina se utiliza bajo la forma de laca alumínica, y laca fosfotúngstca. Reacción nuclear de Feulgen-Rossemberk: Es una coloración citoquímica. Caracteriza el ADN, y se fundamenta en que la red cromática de los núcleos y los cromosomas es delicadamente dibujada, y posee un tinte rojo que permite mediciones cuantitativas mediante histofotometría. Carmín: Colorante natural de color rojo púrpura. Se extrae de cochinillas hembras secadas al calor. Se trata de un quelato metálico. El carmín del comercio es una lada de color rojo, compuesta de ácido carmínico, calcio, aluminio y un compuesto proteico estabilizador. La sustancia colorante no posee carga eléctrica definida, que va a depender del pH. Si es alcalino será negativa y si es ácido será positiva. Se utiliza en forma de carmalumbre, que tiñe las mismas estructuras que las lacas de hemateína. Fucsinas: Como colorantes nucleares se utiliza la fucsina básica y la ácida. El elemento base de las fucsinas es el triamino-trifenil-metano. El color rojo de la sustancia se debe a las sales de ácido clorhídrico. La fucsina del comercio (rubina) es una mezcla de parafucsina y de fucsina (magenta 0+magenta I) y su nombre correcto es fucsina diamante. Neofucsina es un producto comercial patentado. La fucsina ácida ( fucsina S, rubina S) se obtiene del ácido sulfúrico y tiñe las estructuras básicas (Histonas, protaminas). Son muy empleadas para colorear sustancia extracelular en los métodos d coloración tricrómica del tejido conjuntivo y en algunas técnicas para glucoproteínas. Safranina: Es un colorante del grupo de las azinas y posee carga positiva. Sirve para colorear a la cromatina y por lo tanto para el estudio de los cromosomas. El material, fijado con soluciones que contienen osmio y cromo se colorean mejor. Galocianina y azul celestina B: Son colorantes básicos derivados de las oxacianinas. Se combinan con tres iones metálicos para formar lacas que se aplican en cloración nuclear. Tiñen tanto estructuras basófilas como acidófilas. Tiñe de manera electiva los núcleos que adquieren una tonalidad suave, utilizada como laca de cromo colorea específicamente el ADN. También tiñe los corpúsculos de Nissl y otras estructuras formadas por ARN. Se pueden colorear pieza incluidas en gelatina, ya que ésta no se tiñe. Rojo nuclear: Se emplea en forma de laca de aluminio, la cual tiene gran afinidad por los núcleos celulares que aparecen teñidos de rojo. Es utilizado como coloración de fondo en los métodos de tinción del hierro, mucopolisacáridos ácidos, fibras elásticas y el calcio.